L丝氨酸酶法生产工艺放大试验_8.pptx

L-丝氨酸酶法生产工艺放大试验;目录;研究内容：L-丝氨酸 ?概述?L-丝氨酸是一种脂肪族极性α氨基酸。L-丝氨酸是组成蛋白质的常见20种氨基酸中的一种，是哺乳动物的非必需氨基酸，也是生酮氨基酸。在自然界中也有D-丝氨酸，如丝原蛋白中。在一些抗生素中也有D-丝氨酸。符号：S。? 学名：2-氨基-3羟基丙酸。 英文名：L-Serine?，缩写：L-Ser?， 分子式：C3H7NO3?，结构式：CH2OHCH(NH2)COOH?，分子量：105.09?。? 结构式：;药理作用： 磷脂酰丝氨酸补充剂能增加大脑皮层中的神经传递质乙酰胆碱的产量，乙酰胆碱与思维、推理和注意力集中有关联。磷脂酰丝氨酸也能刺激多巴胺的合成和释放。磷脂酰丝氨酸似乎和大脑对压力的反应有关联。一项临床研究发现，在针对健康人施加压力的实验中，服用磷脂酰丝氨酸的人群对于压力的反应要比其他人群低。压力反应是通过衡量血液中促肾上腺皮质激素水平得出的，促肾上腺皮质激素是由脑下垂体分泌的一种激素，它随之促进肾上腺分泌应激激素皮质醇。磷脂酰丝氨酸主要用于治疗痴呆症（包括阿兹海默症和非阿兹海默症的痴呆）和正常的老年记忆损失。 ;国内外的生产情况;鉴于化学合成法和酶法各自的优势,?可将二者结合起来,?即先用化学合成法制备出DL-丝氨酸,?将其氨基乙酰化,?再用固定化酶法进行拆分。现用于氨基酸拆分的酶主要是氨基酰化酶,?通常将酶固定在DEAE-?葡聚糖凝胶A?-25、碘乙酰纤维素或聚丙烯胺凝胶上。将固定化酶均心地装入柱内,?底物(?乙酰化氨基酸)?溶液在合适的柱温、pH?条件下以一定的速度通过酶柱即可。过程如下： ;7;制备工艺路线;发酵过程;2．在12 m3的发酵罐配料罐中加入8.35m3的LB培养基，开启搅拌待混匀后，用泵打入发酵罐中，进行灭菌，用138℃水蒸气先进行间接加热（使培养基从25℃升至90℃），再用蒸汽直接加热（使培养基从90℃升至121℃），然后用冷却水使之冷却到37℃，待用。 3.将种子罐中的料液放入发酵罐中发酵14h，再用离心机进行离心分离，收集菌体，废液放入贮罐中。 ;发酵放大主要过程示意图;生产原料 氢氧化钠溶液用量66040L 浓度1M 盐酸用量66040L pH=2 无水乙醇用量2080L 去离子水用量99060L 717型离子交换树脂用量49530L 产品的主要技术规格 生产规模：80 吨/年 生产方法：717型离子交换树脂离子交换层析后，进行浓缩，之后添加乙醇结晶，离心分离 生产天数：300天 生产周期：1天 生产方式：间歇生产;生产流程简述???: 本设计采用离子交换层析对两种氨基酸（L-丝氨酸和L-甘氨酸）进行分离。???? 基本流程： 反应液→离子交换层析→浓缩→结晶→过滤干燥→产品 ?反应过程:?发酵结束后收集菌体，菌体沉淀中加入蒸馏水制成菌悬液，细胞破碎后加入5-磷酸吡哆醛（PLP，终浓度为2mmol/L），37℃温育24h。然后加入四氢叶酸（终浓度为25mmol/L）、甘氨酸（终浓度为2mol/L）、37％的甲醛溶液（终浓度为50mmol/L）进行酶反应72h;离子交换层析过程 采用717型离子交换树脂，将其装入离子交换罐，保证其密实。然后用氢氧化钠水溶液处理（溶液浓度为1M，体积为66040L）使离子交换柱呈碱性，处理完之后上样。上样后，L-丝氨酸和L-甘氨酸吸附在交换树脂上，可用酸性溶液洗脱，本设计采用pH=2的Hcl溶液洗脱，用量为66040L，洗脱前需要用去离子水洗涤，最终可得氨基酸溶液为16510L，其中L-丝氨酸为6934L。 ;结晶过程 离子交换层析完毕后，对料液进行浓缩。采用蒸汽加热，可将料液浓缩至原体积的1/10。 浓缩过程： 待浓缩液冷却后，加入208L无水乙醇，使L-丝氨酸结晶，最后离心烘干可得产品267kg/天。年操作日为300天。 简述: 717型离子交换树脂→装入离子交换罐→用氢氧化钠溶液处理→上样→用去离子水洗涤→用Hcl溶液洗脱→浓缩→冷却→加入无水乙醇→结晶→离心过滤→烘干→产品 ;工艺分离 生产条件: 已知L-丝氨酸的小试纯化工艺为：717型离子交换树脂用1M的NaOH溶液处理成OH-型，水洗至中性后装柱（三根Φ25×500mm的柱子）。对第一根柱子上样，上样结束后水洗。然后连接另2根柱子，用pH=2的Hcl洗脱，分别收集只含L-丝氨酸、L-甘氨酸，以及同时含这两种氨基酸的洗脱液。假设一个柱子的体积为V，已知NaOH溶液用量为4V，洗涤水用量为2V，洗涤液用量为4V，其中含氨基酸的洗脱液体积为1V，含L-丝氨酸的洗脱液体积为0.42V。将含L-丝氨酸的洗脱液浓缩液浓缩至原体积的1/10，加入3倍体积的无水乙醇，将晶体（湿含量15%）离心烘干，L-丝氨酸的分离得率为77%。年操作日300天，生产