膜蛋白提取方法.pdfVIP

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膜蛋白提取试剂盒 产品组成: 产品编号 BB-3103-1 BB-3103-2 规格 50T 100T 试剂 A 10ml 20ml 试剂 B 20ml 40ml 试剂 C 10ml 20ml 蛋白酶抑制剂混合物 250μl 500μl 储存条件: 蛋白酶抑制剂-20℃保存; 蛋白提取液 2-8 ℃保存。 有效期: 一年。 产品简介: 哺乳动物跨膜蛋白承担各种生物功能,在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜 蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套,因此膜蛋白样本制 备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。 去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构,因而妨碍了膜蛋白的功能研究。 贝博膜蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。本 试剂盒提供全套试剂,适用于从细胞和动物组织提取膜蛋白。提取过程简单方便,可在 1 小时内完成。提取的膜蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。提取的蛋白可 用于 Western Blotting 、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等 蛋白研究。 本试剂盒提取的蛋白不可用于 2D 电泳。如下游实验需要用于 2D 电泳,请使用贝博其 它货号的试剂盒。 应用实例: 1 4 4 图片说明:用膜蛋白提取试剂盒提取细胞样本的SDA的电泳考染照片和Western照片。图1泳 道中1、4分别为Marker、膜蛋白样本。图2为以上样品的EGFR的WB结果照片。 使用方法: A . 细胞蛋白提取 6 ① 1. 取 5-10 ×10 个以上细胞 ,在 4℃,500g 条件下离心 2-3 分钟,小心吸取培养 基,尽可能吸干,收集细胞。 2. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。 3. 细胞样品中加入 200μl 冷的试剂 A ,2ul 蛋白酶抑制剂混合物,高速涡旋振荡 15 秒,置冰上 10-15 分钟,中间每隔几分钟涡旋混匀或用移液器吹打混匀。 注:此步如果细胞裂解不充分,下步有大量细胞沉淀,请延长冰浴裂解时间至30分钟或更 长,直至细胞充分裂解,中间每隔几分钟充分混匀。 4. 再次高

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