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高效毛细管电泳法在药物分析中的应用;该内容共分两部分进行介绍第一部分 概述第二部分 高效毛细管电泳技术的分离模式及应用;第一部分 概述
高效毛细管电泳法(HPCE )又称毛细管电泳法(capillary electrophoresis,CE)。
是以毛细管为分离通道,以高压电场为驱动力,依据供试品中各组分之间淌度(单位电场强度下的迁移速度)和(或)分配行为上的差异而实现分离的新型液相分离分析技术。; 1937年,Tiselius(瑞典)将蛋白质混合液放在两段缓冲溶液之间,两端施以电压进行自由溶液电泳,第一次将人血清提取的蛋白质混合液分离出白蛋白和α、β、γ球蛋白;
第一次的自由溶液电泳; 一台电泳仪;
; 1981年,Jorgenson和Luckas,用75μm内径石英毛细管进行电泳分析,柱效高达40万/m,促进电泳技术发生了根本变革,迅速发展成为可与GC、HPLC相媲美的崭新的分离分析技术——高效毛细管电泳。
1988~1989年出现了第一批毛细管电泳商品仪器。
;一、高效毛细管电泳法的特点; HPCE和普通电泳相比,由于其采用高电场,因此分离速度快;检测器则除了未能和原子吸收及红外光谱连接以外,其它类型检测器均已和HPCE实现了连接检测;一般电泳定量精度差,而HPCE和HPLC相近;HPCE操作自动化程度比普通电泳要高,与传统的电泳相比主要有四个特点,即高效、快速、微量和自动化。;9、我们的市场行为主要的导向因素,第一个是市场需求的导向,第二个是技术进步的导向,第三大导向是竞争对手的行为导向。七月-21七月-21Wednesday, July 14, 2021
10、市场销售中最重要的字就是“问”。22:28:2422:28:2422:287/14/2021 10:28:24 PM
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14、市场营销观念:目标市场,顾客需求,协调市场营销,通过满足消费者需求来创造利润。14 ???月 202110:28:24 下午22:28:24七月-21
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16、我总是站在顾客的角度看待即将推出的产品或服务,因为我就是顾客。2021/7/14 22:28:2422:28:2414 July 2021
17、利人为利已的根基,市场营销上老是为自己着想,而不顾及到他人,他人也不会顾及你。10:28:24 下午10:28 下午22:28:24七月-21
; 毛细管电泳技术兼有高压电泳及高效液相色谱等优点,其突出特点是: ;二、毛细管电泳的基本装置与操作;几个主要部分的特点:; 完成典型的HPCE实验,一般包括以下操作步骤:;;电渗
高效毛细管电泳操作中一个基本组成部分是电渗流(electroosmosis,EOF)。电渗流是毛细管内壁表面电荷所引起的管内液体的整体流动,来源于外加电场对管壁溶液双电层的作用。
CE所用的石英毛细管柱,在pH3的情况下,其内表面带负电,和溶液接触时形成双电层。在高电压的作用下,双电层中的水合阳离子引起流体整体向负极方向迁移的现象叫电渗。
电渗流是毛细管中的溶剂因轴向直流电场的作用而发生的定向流动。
;电渗流的方向; 多数情况下,电渗流速度是电泳速度的5-7 倍。
因此,在毛细管电泳中利用电渗流可将正、负离子和中性分子一起朝一个方向产生差速迁移,在一次CE 操作中同时完成正、负离子的分离测定。由于电渗流的大小和方向可以影响CE 分离的效率、选择性和分离度,所以成为优化分离条件的重要参数。用来控制电渗流的方法主要有改变缓冲溶液的成分和浓度;改变缓冲溶液的pH 值;加入添加剂;毛细管内壁改性;外加径向电场;改变温度等。;四、影响高效毛细管电泳分离的因素;3. 分离电压 相对较高的分离电压会提高分离度和缩短分析时间,但电压过高又会使谱带变宽而降低分离效率。 ;第二部分 高效毛细管法的分离模式
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