蛋白质的一级结构.pptxVIP

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会计学;这种缩合作用可反复进行,形成二肽、三肽、寡肽及多肽; 肽链中一个氨基酸单位称为一个氨基酸残基(residue),一个氨基酸残基较游离氨基酸少一个水分子(末端除外),平均分子量110; 肽链的大小可用所含氨基酸残基的总数表示或相对分子质量表示,大多数天然多肽含50~200个氨基酸残基,相对分子质量在5,500~220,00之间;;2.6.2 肽链是有方向性的(directional);肽键;2.6.3 所有肽链的共价主链结构都是相同的;;;2.6.4 肽链末端羧基、末端氨基及侧链基团可发生不同程度的解离,表现出重要的理化性质;问题3:肽链中可解离基团的(α-COOH,α-NH2 及侧链可解离基团)pKa与游离氨基酸中对应基团的pKa值有何不同?为什么? ;肽具有等电点,调节溶液pH值可改变肽的带电状况,使肽不带电荷而处于等电状态时的pH值为肽的等电点 肽等电点的差别可不同程度反映其氨基酸组成上的差异;反之亦然。 ??电状态时,肽在电场中不向任何一方移动 不同大小的肽片断可用双向凝胶电泳进行分离 肽链中的解离基团可被滴定,但 肽的滴定曲线复杂 短肽以离子晶体存在,具有较高的熔点 肽键上的基团具有相应的化学反应活性。;2.6.5 许多短肽具有重要的生物活性 ——天然存在的活性肽; 体内许多激素属寡肽或多肽; 谷胱甘肽(glutathione ,GSH);L-天冬氨酰-L-苯丙氨酰甲酯,称作:aspartame;2.7.1 多肽与蛋白质的概念不完全相同 The term protein broadly defines molecules composed of one or more polypeptide chains; The term polypeptide is used to define the chain exceeds several dozen amino acids in length (less than 50 amino acid residues); The terms polypeptide and protein are used interchangeably in discussing single polypeptide chain. 问题5:试简述蛋白质的重要生物学功能?;2.7.2 根据蛋白质的组成、或含多肽链数目或形状可对蛋白质进行不同的分类;根据蛋白质形状可分为球状蛋白与纤维状蛋白:;根据含多肽链数目可分为单体蛋白和多体蛋白;应用:由于胶体溶液中的蛋白质不能通过半透膜,因此可以应用透析法将非蛋白的小分子杂质除去;; 蛋白质胶体溶液的稳定性与它的分子量大小、所带的电荷和水化作用有关。;蛋白质处于PI时,净电荷为零。溶解度最低 不同蛋白质 ↓ 等电点不同 ↓ 调节pH值 将蛋白质彼此分开;随着盐浓度的升高,如饱和或半饱和时,蛋白质溶解度逐渐降低,相互聚集而从水溶液中沉淀析出,这种现象叫盐析。 解释:大量中性盐的加入,使水的活度降低,原来的溶液中的大部分自由水转变为盐离子的水化水。降低蛋白质极性基团与水分子间的相互作用,破坏蛋白质分子表面的水化层。 常用的中性盐:(NH4)2SO4 特点:保持蛋白质的天然构象——蛋白质分离、提纯常用方法。;2.8.4 有机溶剂分级分离法:;2.8.5 离子交换层析;Cation- exchange column;即分子排阻层析(也称凝胶过滤层析,分子筛层析);2.8.7 亲和层析;Affinity chromatography;对某一种蛋白质来说,在某一pH时,它所带的正电荷与负电荷恰好相等,即净电荷为零,这一pH称蛋白质的等电点。 pH>pI时,蛋白质带净负电荷,电场中移向正极 pH<pI时,蛋白质带净正电荷,电场中移向负极 pH=pI时,蛋白质不带静电荷,电场中不移动。;聚丙烯酰胺凝胶系统中加入SDS和少量巯基乙醇; ①SDS为阴离子,多肽链覆盖上相同密度的负电荷超过蛋白质原有的电荷量,因而掩盖了不同种类蛋白质间原有的电荷差别。因此,所有SDS-蛋白质复合物,电泳时均以同样的电荷/分子质量比向正极移动。 ②改变了蛋白质单体分子的构象。SDS-蛋白质在水溶液中长椭圆棒,短轴直径均为1.8nm,长轴长度则随蛋白质的分子量而成正比例地变化。 ③可用来测量蛋白质的分子量;区带电泳:外加电场时,蛋白质混合物在具有pH梯度的介质中移向并聚焦(停留)在等于其等电点的pH处,形成区带。 ;测定蛋白质含量的常用方法: 凯氏定氮法: 紫外吸收法 双缩脲法: Folin-酚试剂法(Lowry法): 考马斯亮蓝法(现最常用的方法): 胶体金法:带负电的疏水胶体,洋红色,遇蛋白质

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