发酵工程余龙江发酵工业菌种.pptxVIP

会计学;本章内容 ;第一节最常用的工业微生物;一、细菌;二、放线菌;三、酵母菌;四、霉菌; 五、未培养微生物;第二节发酵工业菌种分离和筛选;一、菌种的来源;;制定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生长培养特性。 采样：有针对性地采集样品。 预处理：提高菌种分离的效率 富集培养：人为地通过控制养分或培条件，使所需菌种增殖培养后，在数量上占优势。 分离：利用分离技术得到纯种。 菌种的筛选：通过常规生产性能测定，进一步筛选产物合成能力较高的菌株。 发酵性能测定：进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。 菌种保藏;1. 采样;（有机质丰富、通气保水性能好）;1. 采样;2.样品的预处理;3. 富集培养;3. 富集培养;3. 富集培养;4. 菌种分离;稀释分离法; 划线分离法——平板划线法;分离方法的选择 ; 自然界中细菌的分离; (一)采样和采集方法;采样的注意事项;5、采好的样应及时处理，暂不能处理的也应贮存于4℃下，但贮存时间不宜过长。这是因为一旦采样结束，试样中的微生物群体就脱离了原来的生态环境，其内部生态环境就会发生变化，微生物群体之间就会出现消长。;1．土样采集方法;2．植物体采集方法; 3．水样采集方法;(二)生态学参数及培养基的组成原则;3、所有分离培养基中都应含有抗真菌剂(如放线菌酮和制霉素)，掺加浓度一般为50μg／m1， 以抑制真菌的生长。 4、琼脂平板在使用前应置于37℃培养箱中孵育l、2天。 5、培养基的生物物理学参数，如pH及盐分也应调节到与试样的生态系统参数值相近。 ;土中细菌的富集培养与分离;富集方法;土样中细菌的富集：适度稀释后，取0.1m1涂布已添加及未添加富集底物(如几丁质、纤维素等)的土浸出汁平板。 植物体上细菌的分离：无菌富集，加植物浸出液适度培养取样，洗涤，取1ml经适度稀释后涂布平板。 水中细菌的分离：水样通过0.22μm无菌滤膜，取出滤膜用1ml无菌稀释液将滤膜上的沉积洗下。用样本稀释液适度稀释,涂布平板倒置培养或滤纸压印分离法???;水中细菌分离的简易富集技术;次代培养及纯化步骤;细菌分离：以乳酸菌为例 ;;放线菌的分离;(一)采样; ;真菌分离; 真菌分离;4、选择性富集：是通过一定的方式使样本中一种或一群微生物数量上的增加而利于分离的一种技术。 富集可以是种水平的，如通过营养要求的改变来富集分离镰刀菌；也可以是组成群水平的，如以纤维素为唯一碳源的选择性培养基可选择性富集所有能降解纤维素的纤维素裂解微生物。 5、选择性抑制培养基可使非目标微生物消除或减少到一定程度。在分离培养基中加入一定的抗生素即可有效地抑制细菌生长及菌落形成。;真菌的分离方法;真菌的分离筛选：以啤酒酵母的分离为例;随机分离原理与技术;药理活性化合物产生菌的筛选 ;生长因子产生菌的筛选;氨基酸产生菌的筛选 ;多糖产生菌的筛选;毒性试验;第三节 发酵工业菌种的育种;一、工业菌种的育种方针; 在生物进化过程中，微生物细胞形成了愈来愈完善的代谢调节机制，在代谢繁殖过程中，能量的利用以及对细胞生长繁殖过程中所需的各种物质的形成是非常合理和经济的，细胞经常处于平衡生长状态，不会有代谢产物的积累。 ;14;15;16;;58;59;60;61;30;;;;;;（一）激活;A→B → ? ? ? ? ? → G;38;（二）抑制;;;;;44;19;;21 21;二、工业菌种育种的常规方法;育种过程;（一）诱变育种;诱变; 1、诱变剂和诱变处理;化学诱变剂： 化学因子如碱基类似物、5—氟尿嘧啶、烷化剂等。 化学诱变剂中使用最多、最有效的是烷化剂。 使用化学诱变剂的优缺点： 1、大多数情况下，就突变数量而言，要比电离辐射更有效。 2、化学诱变剂是很经济的，因为只需要少量的合适的诱变剂，设备是实验室的一般玻璃器皿，一个蒸气罩。而用电离辐射工作时，设备费用大，并要注意安全性。 3、大部分诱变剂是致癌剂，所以在使用中必须非常谨慎，要避免化学诱变剂与皮肤接触，，且切勿吸入其蒸气，有人对某些诱变剂极其敏感，甚至未直接接触就会过敏，这就更要当心;2、诱变剂的选择;3．吖啶类诱变剂可以造成生化代谢途径的完全 中断。 4．紫外线仍十分有效。电离辐射是造成染色体 巨大损伤的最好诱变剂，它能造成不可回复 的缺突变。但它可能影响邻近基因的性能。 ;3、诱变育种步骤;(1)出发菌株的选择; 5．要尽量选择单倍体细胞、单核或核少的多细胞体来作出发诱变细胞，这是由于变异性状大部分是隐性的，特别是高产基因。 6．根据采用的诱变剂或根据细胞生理状态或诱变