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蔬菜质量安全快速检测技术与应用 ;无公害蔬菜基地的认证过程;蔬菜质量安全快速检测技术的检测指标;我国现行的主流检测技术体系;农药残留量快速检测方法;传统的农药残留量分析技术的一般过程 ;传统的农药残留量分析技术的优缺点 ;传统的农药残留量分析技术存在的问题 ;国内外现行的农药残留量快速检测方法;我国现行的农药残留量分析的总体解决方案 ;农药残留量快速检测技术的优缺点 ;我国现行的农药残留量快速检测技术 ;农药的分类 ;农药残留量快速检测技术的检测对象 ;蔬菜农药残留量危害程度评估及取样方法;产地蔬菜样品采集方法;产地蔬菜样品采集方法;常见蔬菜农药残留量的采集对象及检测部位;蔬菜农药残留量快速检测结果判定基本原则;速测卡法(纸片法,GB/T 5009.199—2002) ;速测卡法(纸片法,GB/T 5009.199—2002);速测卡法(纸片法,GB/T 5009.199—2002);速测卡法(纸片法,GB/T 5009.199—2002);速测卡法(纸片法,GB/T 5009.199—2002);速测卡法测定结果;速测卡法(纸片法,GB/T 5009.199—2002);速测卡法(纸片法,GB/T 5009.199—2002);酶抑制法(GB/T 5009.199-2002、NY/T 448-2001) ;1、试剂
pH8.0缓冲溶液:取11.9mg无水磷酸氢二钾与3.2mg磷酸二氢钾,用1000mL蒸馏水溶解。
显色剂:取160mg二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和15.6mg碳酸氢钠,用20mL缓冲溶液溶解,在4℃冰箱中保存。
底物:取25.0mg硫代乙酰胆碱加8.0mL蒸馏水溶解,摇匀后置于4℃冰箱中保存,保存期不超过一周。
乙酰胆碱酯酶:根据酶的活性情况,用缓冲溶液溶解,但吸光度值应控制在0.3以上。
2、仪器
常量天平
37℃±2℃恒温水浴或恒温箱
分光光度计或快速测定仪;分析步骤
① 样品处理:选取有代表性的蔬菜样品,檫去表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取1g放入烧杯或提取瓶中,加入5mL缓冲溶液浸没菜叶,每3min摇动一下烧杯,于10min后吸取2.5mL提取液于试管,待测。
② 测定:
对照溶液测试:于试管中加入2.5mL缓冲溶液,再加入0.1mL酶液、0.1mL底物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即放入仪器比色池中,于410nm波长下比色,记录反应3min的吸光度变化值或仪器记录值A0。
样品测试:于试管中加入2.5mL样品提取液,其它操作与对照溶液测试相同,记录反应3 min的吸光度变化值或仪器记录值At。
③ 结果的表述计算:
注意:使用速测仪可以直接读出抑制率值,而无须手工计算。;结果判定 ;CL-1型农药残留速测仪的操作步骤
① 将阻断光路黑块放入速测仪的比色池内,接通仪器电源,此时仪器自动进入预热阶段,显示屏显示数值为1200;
② 仪器显示数值由1200减少为0,并发出“嘀”蜂鸣声时,表示仪器预热完成(整个过程约需时15min);
③ 按下“0”按钮,进行调“0”操作,此时仪器显示数值为0或其左右的数值;
④ 取出阻断光路黑块,按下“100”按钮,进行调满度操作,此时仪器显示数值为100或其左右的数值;
⑤放入对照溶液,按下“对照”按钮,仪器将自动进行对照样品的测试,3min后,仪器发出“嘀”蜂鸣声时,表示对照溶液测试完成;
⑥取出对照溶液,放入待测样品,按下“样品”按钮,仪器将自动进行待测样品的测试,3min后,仪器发出“嘀”蜂鸣声时,表示样品溶液测试完成,此时按下再次“样品”按钮,仪器即可显示样品抑制率;
⑦其余样品的测定重复步骤⑥的操作即可。;部分农药浓度与抑制率对照(实验条件:37℃,乙酰胆碱酯酶);酶抑制法的使用注意事项
葱、蒜、胡萝卜、生姜、韭菜等蔬菜中含有破坏酶活性或使蓝色产物褪色的物质,处理这类样品时,不要剪得太碎,浸提时间不要太长,必要时可采取整株(体)蔬菜浸提法。
如室温低于20℃,建议使用30℃水浴,即提取液要在水浴中预热,并且加入酶液后的试管也需要放置于水浴中,同时室温也应控制在20℃以上。
速测试剂对农药非常敏感,测定时如果附近喷洒农药或使用卫生杀虫剂,以及操作者和器具沾有微量农药,都会对检测结果带来影响。
速测仪长期处于开机等待状态时,应将阻断光路黑块放入速测仪的比色池内,避免仪器感光元件因过度疲劳而损坏。
标准NY/T 448—2001使用的丁酰胆碱酯酶对甲基对硫磷、乐果、毒死蜱、二嗪磷等农药不太灵敏,检出浓度均在10mg/kg以上。;方法特点
该方法是与国际接轨的一个农药残留量快速检测方法,它等同于美国公职分析化学师协会AOAC 12th 29.049-29.055《食品中有机磷农药残留测定—胆碱酯酶抑制法》方法,在国外已得到普遍的应用,检测结果更具可比性。
方
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