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- 2021-09-05 发布于上海
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分子生物学汇总会计学第1页/共70页基因(gene)一、基因(组)与遗传:基因的分子生物学概念基因的遗传学概念第2页/共70页从遗传学史的角度看,基因概念大致分以下几个阶段泛基因(或者称前基因)阶段孟德尔的遗传因子阶段摩尔根的基因阶段顺反子阶段操纵子阶段现代基因阶段第3页/共70页现代基因阶段 ——重新认识基因的阶段基因是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位对于编码蛋白质的结构基因来说,基因是决定一条多肽链的DNA片段第4页/共70页根据其是否具有转录和翻译功能可以把基因分为三类第一类是编码蛋白质的基因,它具有转录和翻译功能,包括编码酶和结构蛋白的结构基因以及编码阻遏蛋白的调节基因第二类是只有转录功能而没有翻译功能的基因,包括tRNA基因和rRNA基因第三类是不转录的基因,它对基因表达起调节控制作用,包括启动基因和操纵基因第5页/共70页基因组(genome)基因组: 细胞内遗传信息的携带者DNA的总体基因组中不同的区域具有不同的功能: ? 有些区域编码蛋白质的结构基因 ? 有些区域复制及转录的调控信号 ? 有些区域的功能尚不清楚第6页/共70页基因组的结构不同的功能区域(DNA fragment)在整个DNA分子中的分布情况第7页/共70页基因组结构第8页/共70页基因组结构第9页/共70页??不同生物体中DNA的大小 ?第10页/共70页二、遗传物质染色体与DNA的区别与联系2 .1 染色体(Chromosome) 染色体 染色质 DNA 1 RNA 0.1 蛋白质 组蛋白1 H1 H2A H2B H3 H4 非组蛋白 0.6第11页/共70页2.1.1 染色体的特点2.1.2 真核生物(eukaryote) 染色体的组成2.1.2.1 蛋白质----组蛋白和非组蛋白1)组蛋白的一般特性第12页/共70页 进化上的保守性不同生物的组蛋白氨基酸组成十分相似。牛、猪、大鼠的H4氨基酸完全相同。牛和豌豆的H4序列只有2个氨基酸差异;鲤鱼和小牛胸腺的H3只差1个氨基酸。保守程度:H1→ H2A、H2B → H3 、H4 无组织特异性仅发现鸟类、鱼类及两栖类红细胞不含H1而含H5,精细胞组蛋白为鱼精蛋白是例外。 第13页/共70页肽链氨基酸分布的不对称性碱性氨基酸分布在N端的半条链上,如N端的静电荷为16+,C 端仅3+;碱性半条链与DNA负电荷区结合,另半条链与其他蛋白结合。 组蛋白的可修饰性在细胞周期特定时间可发生甲基化、乙酰化、磷酸化和ADP核糖基化等。H3、H4修饰作用较普遍,H2B有乙酰化作用、H1有磷酸化作用。 H5组蛋白的特殊性富含赖氨酸(24%),与H1无明显亲缘关系。第14页/共70页2)非组蛋白的一般特性 多样性有30~600种,常见15~20种。分子质量1.5 X104~1.8x105。包括:酶类、收缩大蛋白、骨架蛋白、核孔复合物蛋白、肌动蛋白、肌球蛋白、微管蛋白、原肌蛋白等。DNA结合蛋白为DNA复制和转录有关的酶;HMG蛋白系DNA超螺旋有关的蛋白;A24非组蛋白与组蛋白相似,功能不详 组织特异性同义个体不同的组织,基因表达的差异与非组蛋白的特异性有关。 种属特异性不同物种,组蛋白存在保守性。而非组蛋白存在很大的差异,反映物种的多样性。第15页/共70页第16页/共70页2.1.2.2. DNA DNA是染色体的核心部分。DNA和RNA统称核酸。核酸的理化特性包括:稳定性、酸效应、碱效应、化学变性、热变性、紫外线吸收性、减色性复性、黏性、浮力梯度等。1) DNA的变性和复性 变性(Denaturation) DNA双链的氢键断裂,最后完全变成单链的过程称为变性。 增色效应(Hyperchromatic effect)在变性过程中,260nm紫外线吸收值先缓慢上升,当达到某一温度时骤然上升,称为增色效应。 融解温度(Melting temperature,Tm ) 变性过程紫外线吸收值增加的中点称为融解温度。生理条件下为85~95OC影响因素:G+C含量,pH值,离子强度,尿素,甲酰胺等第17页/共70页第18页/共70页 复性(Renaturation)热变性的DNA缓慢冷却,单链恢复成双链。复性出现减色效应(Hypochromatic effect)。复性的速率与DNA的浓度和序列的复杂性有关。 Cot1/2变性和复性是可逆的。以Co代表完全变性的DNA单链的起始浓度,在时间 t时的浓度变化是: dC/dt = kCo2 积分后C/Co = 1/(1+kCot)k为复性的速度常数。以C/Co 对Cot作图,得Cot曲线。当C/Co = 0.5, Cot值称为Cot1/2 。Cot1/2与k 的关系为 k = 1/
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