饲料主要蛋白原料掺假的检测方法.docx

第 PAGE \* Arabic 6 页 鱼粉的质量鉴别 一、 鱼粉中掺入植物性杂质的检测 凡植物来源的均含有淀粉和木质素。淀粉可与碘化钾反应，产生蓝色或蓝黑色化合物；木质素在酸性条件下，可与间苯三酚反应，产生红色化合物。故利用上述两种反应，即可迅速检测鱼粉中是否含有植物来源的掺假物。 检测方法： （1） 取被检鱼粉1～2克入试管中，加4～5倍蒸馏水加热至沸以浸出淀粉。冷却后，滴入1～2滴碘－碘化钾溶液（取碘化钾6克加入100毫升蒸馏水中，再加入2克碘，溶解后遥匀，置棕色瓶中保存），若溶液即现蓝色或黑蓝色，表明鱼粉中掺入淀粉。 （2） 取被检粉碎鱼粉少许平铺入表面皿中，用间苯三酚液（2克间苯三酚溶入100毫升90％乙醇中）浸湿，放置5～10分钟，再滴加2～3滴浓盐酸，若试样中出现散布的红色点，说明鱼粉中掺入了含木质素物质。 二、鱼粉中掺入血粉的检测 血粉中含有铁质，该铁质具有类似过氧化物酶作用，能分解过氧化氢放出新生态氧，使联苯胺氧化成联苯胺蓝，出现蓝色环点。根据环点的有无，即可判断出鱼粉是否掺入血粉。 检测方法： 取少许被检鱼粉入白瓷皿或白色滴板中，加联苯胺－冰乙酸混合液数滴（1克联苯胺加入100毫升冰乙酸中，加150毫升蒸馏水稀释）浸湿被检鱼粉，再加3％过氧化氢液一滴，若掺有血粉被检样即显深绿或蓝绿色。 三、鱼粉中掺入非蛋白氮化合物的检测 1、 鱼粉中掺入铵盐、尿素的检测 铵盐一般均含氨态氮。尿素在碱性条件下经脲酶催化也可生成氨态氮。奈氏试剂可与氨态氮反应生成棕红色胶体络合物，并可依红棕－红褐－深红色的颜色变化，判断其掺入量的多少。 检测方法： 1.1奈氏试剂法：取被检鱼粉1～2克加入250毫升烧杯中，加蒸馏水25～50毫升，混合均匀后静置20分钟，以便掺入的铵盐或尿素充分溶入水，备用。另取试管一支，加奈氏试剂2毫升（称碘化钾5克加入5毫升蒸馏水中，边搅拌边滴加25％氯化汞饱和液至稍有红色沉淀出现。再加40毫升50％NａＯＨ溶液，最后用蒸馏水稀释至100毫升，混匀入棕色试剂瓶中保存）。然后沿管壁用滴管加上述被检样浸出液1～2滴，液面立即出现棕红色环，表明有铵盐掺入。若液面出现白或黄色环，可疑有尿素掺入，再用脲酶法进行进一步检测。 1.2脲酶法① 取10克被检鱼粉于烧杯中，加100毫升蒸馏水搅拌、过滤，取滤液少许于点滴板上，加2～3滴甲基红指示剂（0.1克甲基红溶入100毫升95％乙醇中），再滴加2～3滴脲素酶溶液（0.2克脲素酶溶入100毫升95％乙醇中）.在40～50℃水浴上加热1～2分钟，静置5分钟。若点滴板上呈深红紫色，说明鱼粉中掺入了尿素。无脲素酶时，可用下法检测。取两份1.5克被检鱼粉入两支试管中,其中一支加入少许黄豆粉,然后两管各加入5毫升蒸馏水,摇匀后置60～70℃恒温水浴锅中3分钟，再滴加2～3滴甲基红指示剂。若加生黄豆粉的试管中呈较深紫红色，说明鱼粉中掺入了尿素。②称取被检鱼粉2～3克加入250毫升三角瓶中，加蒸馏水100毫升，黄豆粉滤液20毫升（5克生黄豆粉入100ml水中浸泡lh，过滤），加塞摇匀。置40-45℃水浴锅内温热30min（温度不宜超过45℃，否则脲酶失活）、最后用镊子取红色石蕊试纸一条浸入该溶液中，若试纸变蓝；表明被检鱼粉掺有尿素。 1.3定量法。取一个500ml烧瓶置可调温电炉上，用玻璃管，皮管连接冷凝管，冷凝管口浸入滴有 3 滴甲基红一溴甲酚绿指示剂和 50ml l％的硼酸接收液中，接通冷凝水，此即定量检测的蒸馏装置。然后将怀疑掺有尿素的样本液快速无损地倒入烧瓶中（三角瓶用蒸馏水冲洗3次，使所有残液、残渣全部入烧瓶中），并加蒸馏水至烧瓶1／2处。加热瓶内溶液至沸腾后调低电炉温度，使溶液保持沸而不溢状态。当蒸馏出瓶内溶液1／3后，用红色石蕊试纸蘸一下冷凝管口的馏出液，若试纸不变色，停止蒸馏。用标准的HCI溶液滴定接收液呈灰红色即为终点。根据所耗HCI毫升数即可计算出试样中掺入尿素的百分含量。 试样中尿素含量％＝0.03*V*N/W V一滴定所耗标准HCI液毫升数 N-HCI标准液的实际当量浓度 W一试样重量 0.03一尿素含氮相对V、N的比值 1.4 格里斯试剂法。该法原理是在酸性条件下尿素与亚硝酸钠作用，产生黄色反应。若无尿素，则亚硝酸钠与对氨基苯磺酸发个重氮反应，其产物与a一萘胺起偶氮作用，呈紫红色。 检测方法： 取被检鱼粉 1克入烧杯中；加 20ml蒸馏水混匀，静置 20min。取上清液 3ml入 50ml三角瓶中，加 1％亚硝酸钠液 lml、浓 H2SO41ml，摇匀后静置 5min、待泡沫消失后，加格里斯试剂（酒石酸89克，对氨基苯磺酸10克，α一萘胺1克，混匀研碎，置棕色瓶保存）0.5g，摇匀．显黄色说明被检样掺有尿素，显紫红色说明未掺。 三 、鱼粉中掺入双缩脲