分子生物学课件：核酸的体外扩增.pptVIP

(十) 差异显示PCR(differentiated display PCR)又称mRNA差别显 示( mRNA DD) 或差异显示逆转录PCR(DDRT-PCR) 是一种筛选mRNA及表达基因存在差异的方法 原理:首先将所要比较的两种mRNA样品(例如细胞诱导前后)逆 转录生成cDNA第一链。然后利用12种3? 锚定引物(T11MA、T11MG、 T11MC、T11MT，M代表A、G、C三种脱氧核苷酸中任何一种)和24-26 种5? 十聚随机引物进行PCR反应。利用锚定引物, 随机引物构成组 合,能将哺乳动物细胞内任一种cDNA片段扩增出来 发现两种 PCR产物的差异片段 PAGE AAAAAAAAAAA TTTTTTTTTTT NM M = A, G, C N = A, G, C, T 3 x 4 = 12 24 x 12 = 288 种组合 2 x 288 = 576 (十一)重组PCR (recombinant PCR) PCR参与