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{工程建筑套表}八基因工 程与体外表达 1 ．限制性核酸内切酶的分类 Ⅰ型酶具有限制和DNA 修饰作用。这种酶在非特异性位点,通常在识别位点 下游 100 到 1000bp 处切割 DNA 。 Ⅱ型酶能在DNA 分子内部的特异位点，识别和切割双链 DNA ，其切割位点的 序列可知、固定。 Ⅲ型酶与Ⅰ型酶一样，具有限制与修饰活性，能在识别位点附近切割 DNA ， 切割位点很难预测。 2 ．限制性内切酶的命名 EcoR ⅠE 代表 Escherichia 属 co 代表 coli 种 R 代表 RY13 株 3 ．限制性内切酶的识别和切割位点 通常是 4～6 个碱基对、具有回文序列（palindrom）的DNA 片段，大多数酶是错 位切割双链 DNA ，产生5 ˊ或3 ˊ粘性末端（stickyend）。 如 EcoR Ⅰ切割后产生5 ˊ粘性末端. Pst Ⅰ切割后产生3 ˊ粘性末端. 有一些酶沿对称轴切断 DNA ，产生平端或钝端（Bluntend ）,如 Sma Ⅰ. 二、其他常用的工具酶 1.DNA 聚合酶Ⅰ(DNApolymeraseI) 有聚合酶活性,3ˊ→5 ˊ核酸外切酶活性,5ˊ→3 ˊ核酸外切酶活性。 2.DNA 聚合酶Ⅰ大片段 DN