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2021年人教版高中生物课堂笔记生物选修笔记
2021年人教版高中生物课堂笔记生物选修笔记
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2021年人教版高中生物课堂笔记生物选修笔记
生物选修三知识点
基因工程诞生(三个理论和三个技术):
基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科基本上发展起来,正是这些学科基本理论和有关技术发展催生了基因工程,详细有三大理论发现和三个技术突破。
理论基本:DNA是遗传物质;DNA分子双螺旋构造和半保存复制;遗传密码通用性和遗传信息传递方式;
技术基本:限制性核酸内切酶发现与DNA切割;DNA连接酶发现与DNA片段连接;基因工程载体构建与应用
理论上三大发现
⑴、发现了遗传物质——DNA
1944年,艾弗里(O.T.Avery)肺炎双球菌转化实验
⑵、揭示了遗传物质分子机制:DNA分子双螺旋构造和半保存复制
1953年,沃森(J.D.Watson)和克里克(F.Crick)DNA双螺旋构造模型、半保存复制图,获1958年诺贝尔奖。
⑶、确立了遗传信息传递方式:以密码形式传递
1963年,美国尼伦伯格(M.W.Nirenberg)和马太(H.Matthaei)确立了遗传信息以密码形式传递,破译了编码氨基酸遗传密码(3个核苷酸=1个密码子=1个aa)。
技术上三大突破
⑴、世界上第一种重组DNA实验:实现不同来源DNA体外重组
1972年斯坦福大学化学家伯格(P.Berg)借助内切酶和连接酶将猴病毒SV40DNA和大肠杆菌λ噬菌体DNA在试管中连接在了一起,第一次成功地实现了DNA体外重组。
⑵、第一种基因克隆实验:重组DNA表达实验,是世界上第一种基因工程实验
1973年美国斯坦福大学医学院遗传学家科恩(S.Cohen)将体外构建具有四环素和卡那霉素抗性基因重组质粒导入大肠杆菌,获得了具备双抗性大肠杆菌转化子,成功完毕了第一种基因克隆实验。是基因工程诞生标志。
⑶、第一种真核基因在原核生物中表达:第一次实现了异源真核基因在原核生物中表达
1974年,科恩(S.Cohen)和博耶(H.Boyer)将非洲爪蟾编码核糖体基因DNA片断同pSC101质粒重组,并导入大肠杆菌细胞,成果表白动物基因已进入大肠杆菌并转录出相应mRNA产物,第一次实现了异源真核基因在原核生物中表达。
专项1 ? 基因工程
基因工程概念
基因工程是指按照人们
愿望,进行严格设计,
通过体外DNA重组和转基因
技术,赋予生物以新遗传
特性,创造出更符合人们需
要新生物类型和生物产
品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工,又叫做DNA重组技术。
(一)基因工程基本工具
1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)
(1)来源:重要是从原核生物中分离纯化出来。
(2)功能:可以辨认双链DNA分子某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位两个核苷酸之间磷酸二酯键断开,因而具备专一性。
(3)成果:经限制酶切割产生DNA片段末端普通有两种形式:粘性末端(EcoR = 1 \* ROMAN I酶)和平末端(Sma = 1 \* ROMAN I酶)。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)比较:
①相似点:都缝合磷酸二酯键。
②区别:E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DNA片段互补黏性末端之间磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端之间效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有核苷酸片段末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运送车”——载体
(1)载体具备条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具备一至各种限制酶切点,供外源DNA片段插入。
③具备标记基因,供重组DNA鉴定和选取。
(2)最惯用载体是质粒,它是一种裸露、构造简朴、独立于细菌染色体之外,并具备自我复制能力双链环状DNA分子。
(3)其他载体: 噬菌体衍生物、动植物病毒
(二)基因工程基本操作程序
第一步:目基因获取
1.目基因是指: 编码蛋白质构造基因 。
2.原核基因采用直接分离获得,真核基因是人工合成。人工合成目基因惯用办法有反转录法_和化学合成法_。
①从基因文库(基因组文库或cDNA文库)中获取
②人工合成目基因:惯用办法有化学合成法和 反转录法。
3.PCR技术扩增目基因
(1)原理:DNA双链复制
(2)过程:第一步:加热至90~95℃DNA解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链合成。
第二步:基因表达载体构建
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