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大鼠神经功能研究管理论文 【摘要】目的研究川芎(CHX)生物碱对局灶性脑缺血再灌注（I/R）大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及动物苏醒后神经功能、脑梗死容积的影响。方法腹腔注射（ip）CHX生物碱50、100、200mg/kg和生理盐水1w后将其制成局灶性脑大鼠损伤模型，并检测血清中的SOD活性、MDA含量，神经功能损伤评分以及脑梗死容积的变化，同时与假手术组比较。结果I/R组与假手术组相比，血清中的SOD活性降低，MDA含量增加（P＜0.01）。CHX50mg/kg组、CHX100mg/kg组、CHX200mg/kg组与I/R组相比，血清中的SOD活性均升高（P＜0.01），MDA含量均降低（P＜0.05），脑梗死容积明显缩小（P＜0.01）；神经功能评分差异显著（P＜0.05）。结论CHX生物碱对脑I/R引发的自由基损伤有保护作用，从而减轻脑I/R后脑组织的损害。 【关键词】川芎生物碱；缺血再灌注；超氧化物歧化酶；丙二醛；自由基 近年来，人们倾向于采用超早期溶栓治疗脑梗死，迅速恢复局部血供，以达到理想的治疗效果，但缺血再灌注（I/R）损伤可引起一系列复杂的继发改变，导致缺血组织损伤恶化〔1〕。如何防止脑I/R，寻找有效的防治药物，促进脑卒中后中枢神经系统功能恢复，一直是相关学科研究的重点之一。某些中药如叁附、大黄、川芎等经临床验证可通过多种环节防止缺血性损伤〔2〕,但目前国内有对照的临床研究病例数较少,本实验通过观察川芎（CHX）中的生物碱对大鼠脑I/R损伤后血清中的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量及动物苏醒后神经功能评分、脑梗死容积大小的影响探讨CHX生物碱对脑I/R损伤的保护作用，为CHX防治中枢神经系统缺血性损伤提供理论依据。 1材料与方法 1.1动物分组及给药方法选择健康Wistar大鼠50只,体重280～350g，由吉林大学实验动物中心提供。编号：SCXK(吉)20030004，随机分成5组，每组10只。CHX生物碱由北华大学药学院中药研究室制备,用时调配至所需浓度。①I/R组（生理盐水组10ml/kg），腹腔注射（ip）生理盐水10ml/kg7d，每天1次。②I/R＋CHX50mg/kg组，ipCHX生物碱50mg/kg连续7d，每天1次。③I/R＋CHX100mg/kg组，ipCHX生物碱100mg/kg连续7d，每天1次。④I/R＋CHX200mg/kg，ipCHX生物碱200mg/kg连续7d，每天1次。⑤假手术组，进行手术而未制造大鼠局灶性脑I/R病理模型。⑥阳性对照组，用葛根素（GGS）5mg/kg，连续7d，每天1次。除假手术组外，其余各组用药7d。后制造大鼠局灶性脑I/R病理模型。 1.2I/R造摸方法大鼠用25％乌拉坦ip（0.3ml/100g）加乙醚吸入麻醉。背位固定，颈右侧切口，暴露右颈总动脉（CCA）。向外牵引二腹肌和胸锁乳突肌，由CCA分叉处向头端依次游离。电凝颈外动脉（ECA）的所有分支。在甲状腺上动脉远端结扎，切断ECA，使其主干游离备用，然后分离颈内动脉（ICA）至颅底，结扎其分支翼腭动脉，仅保留ICA入颈主干。用1号丝线在ECA根部打一松扣，用动脉夹暂时关闭CCA和ICA，将预先制备好的尼龙线经ECA主干的切口插入至CCA分叉处,将ECA根部的丝线缚紧,以防止其中的尼龙线滑出或出血，然后移去ICA的动脉夹，将动脉夹缓慢向ICA入颈的方向推进，以分叉处为标记，推进约17mm时可感到阻力，表明尼龙线的头端已通过大脑中动脉（MCA）的起始处,到达较细的大脑前动脉内，移去CCA上的动脉夹，此时即完成右侧MCA的阻塞，缝合切口，将尼龙丝的尾端留在皮外，再灌注时将尼龙线轻轻抽感到阻力时，表明尼龙线的头端已回到ECA的主干中，从而实现MCA的再灌注。术中及术后注意保持体温，室温保持在20℃～24℃。 1.3检测指标及方法采用黄嘌呤氧化酶法检测血清中SOD活性（单位：U/ml）；硫代巴比妥酸显色法检测血清中MDA含量（单位：nmol/L）;TTC染色法及图像处理软件（AdobePhotoshop6.0）计算脑梗死面积，各脑片梗死面积之和乘以厚度（2mm）为总脑梗死容积。动物苏醒后放回鼠笼，自由饮食。脑缺血2h再灌注2h后，由一名不了解情况的观察者评估记录神经行为学评分,方法参考Zealonga等的报道〔3〕，即7级评分方法：0级，无异常；0.5级，竖毛，轻度运动低下；1级，前肢屈曲，运动障碍；2.0级，行动不协调，屈取姿势，旋转运动；3.0级，偏瘫，不能站立和行走；4.0级，痉挛，昏睡；5.0级，死亡。 1.4统计学处理采用SPSS10.0统计学软件，组间进行方