【生物】土壤中微生物的分离纯化(电子版实验报告).docx

精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 微生物试验报告 土壤中微生物的分别与纯化 指导老师：李海花周四晚第四组 试验成员 : 杜玉琪 180112021009 董天涵 180112021008 蒋怡菲 180112021018 逄颖 180112021035 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 【摘要】 利用分别纯化微生物的基本操作技术对土壤中的微生物进行分别和 纯化，通过观看微生物的菌落形状特点判定菌的类型并通过平板划线进行分别纯化 【关键词】 土壤 ，微生物，菌落观看，分别纯化 试验目的 （ 1）通过对几种培育基的配制，把握配制培育基的一般方法和步骤； 把握倒平板的方法，接种和无菌操作技术； 初步观看来自土壤中的几类微生物的菌落形状特点， 并能判定菌的类型； 学习平板菌落计数的基本原理和方法，并把握其基本技能； 试验原理 （ 1）培育基的配制与灭菌 培育基是人工配制的适合微生物生长繁衍或积存代谢产物的养分基质，用以培育，分 离，鉴别，储存各种微生物或积存代谢产物；一般的培育基应包含适合微生物生长的 6 大养分素即水分，碳源，氮源，能源，无机盐和生长因子；不同微生物对 pH 要求不一样，霉菌和酵母菌的培育基的 pH 一般是偏酸的，而细菌和放线菌培育基的 pH 一般为中性或微碱性；所以配制培育基时仍要依据不同微生物的要求将培育基的 pH 调到合适的范畴；已配制 好的培育基必需立刻灭菌， 如来不及灭菌， 应暂存冰箱， 以防止其中微生物生长繁衍而消耗养分和转变培育基酸碱度所带来不利影响； （ 2）微生物的培育及鉴定 接种：将微生物的培育物或含有微生物的样品移植到培育基上的操作技术称之为接种； 接种是微生物试验及科学争论中的一项最基本的操作技术； 接种的关键是要严格的进行无菌操作；鉴定：常见与常用的微生物中 ,依据它们的主要形状可分为细菌，放线菌，酵母菌和霉菌四 大类；细菌菌落光滑，易于基质脱离；放线菌菌落质地致密，菌落较小，广泛延长；酵母菌菌落较细菌菌落大而厚；霉菌形成的菌落较稀松，多成绒毛状，絮状； （ 3）平板分别与活菌计数 倒平板： 按稀释涂布平板法倒平板， 并用记号笔标明培育基名称， 土样编号和试验日期 等； 划线：在近火焰处，左手拿皿底，右手拿接种环，菌种在平板上划线；通过划线将样品 在平板上稀释， 培育后能形成单独的菌落； 平板计数法是将测菌液经适当稀释， 涂布在平板上， 经过培育后在平板上形成肉眼可见的菌落；统计并记录菌落数； （ 4） 细菌的分别与纯化 为了得到单一菌种， 要对培育的菌分别和纯化； 用接种环挑起培育基里少量菌在无菌条件下接种到新的培育基上，划线，连续进行培育，从而得到新的单一菌落； 试验器材 培育皿，载玻片，量筒 培育皿，载玻片， 量筒，滴管，吸水纸，烧杯，三角瓶，酒精灯，玻璃棒，接种 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 环，镊子， 恒温培育箱，高温灭菌锅， 无菌操作台 ， 天平，滤纸， pH 试纸等 ； （ 2）试剂： 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 配制牛肉膏蛋白胨培育基的原料（牛肉膏， 配置高氏 I 号培育基的原料（ 可溶性淀粉， NaCl ，琼脂，蛋白胨） ， KNO 3， K 2HPO 4， MgSO 4· 7H 2O ， 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 NaCl ， FeSO 4· 7H 2 O ，琼脂 ， pH=7.4-7.6 ） 配制查氏培育基的原料（硝酸钠，磷酸氢二钾，硫酸镁，氯化钾，硫酸亚 铁，蔗糖，琼脂，蒸馏水） 配制无氮培育基的原料（葡萄糖， K 2HPO 4， MgSO 4 · 7H 2O， NaCl ， CaSO 4·2H 2 O ， CaCO 3 ，pH=7.0-7.2 ） （ 3）菌种： 土壤稀释液 4 . 试验步骤 （ 1）高氏培育基的配制 1 培育基的配方： 可溶性淀粉 ········································ 20.0 g KNO3 ············································ 1.0 g K2HPO4 ·········································· 0.5 g MgSO4. 7H2O ······································· 0.5 g NaCl ············································ 0.5 g FeSO4. 7H2O ······································· 0.01 g