11DNA重组技术的基本工具用.pptxVIP

植物的组织培养生态工程胚胎工程理论基础基因工程的原理及技术生态工程建设基因工程 的诞生生物技术中的伦理问题细胞工程动物胚胎发育动物细胞培养生态工程原理基因工程应用生态工程实例胚胎干细胞移植细胞融合与单克隆抗体体细胞克隆蛋白质工程胚胎工程基因工程胚胎工程应用转基因生物 的安全性生物武器对人类的威胁选修3核心知识关系现代生物科技专题1.1DNA重组技术的基本工具 能否培养出具有抗虫性状的抗虫棉呢？设想一 胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能从猪、牛等动物的胰腺中提取，产量低成本高。 而微生物生长迅速，容易控制。于是科学家设想，若能将人的胰岛素基因导入微生物体内，并得以表达，就不仅能解决产量问题，还能大大降低生产成本，使药品价格大幅下降。 能否让微生物产生出人的胰岛素等珍贵药物？设想二这些定向改造基因的设想能实现吗？ 经过多年的努力，科学家终于在20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术 ——基因工程基因工程的概念基因工程：指按照人们的愿望,进行严格的设计并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作DNA重组技术或基因拼接技术。基因工程的概念基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程实质结果基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平剪切→ 拼接→ 导入→ 表达基因重组人类需要的基因产物普通棉花(无抗虫特性)苏云金芽孢杆菌与运载体DNA拼接，导入棉花植株(有抗虫特性)抗虫基因棉花细胞(含抗虫基因)基因工程培育抗虫棉的简要过程：抗虫棉的培育有哪些关键步骤？解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？提取表达基因工程培育抗虫棉的关键步骤：关键步骤一：抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来关键步骤二：抗虫基因与棉花DNA“缝合”关键步骤三：抗虫基因进入棉花细胞解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？“分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶“分子缝合针”—— DNA连接酶“分子运输车”—— 基因进入受体细胞的载体§1-1 DNA重组技术的基本工具DNA 重组技术的基本工具“分子手术刀” ──限制酶 “分子缝合针” ──DNA连接酶 “分子运输车”──基因进入受体细胞的载体 黏性末端平末端一、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶 1、来源： 主要是原核生物2、种类：4000种。识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。3、作用：4、切割方式：错切和平切5、结果：形成两种末端ATCAGTC限制酶切割磷酸二酯键G55 A磷酸二酯键点击播放限制性内切酶作用过程常见的两种限制酶1、大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别 GAATTC序列，并在G和A之间切开形成黏性末端。 2、SmaⅠ能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切割形成平末端 。SmaⅠ平末端　　　平末端EcoRⅠ黏性末端　黏性末端什么叫黏性末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。什么叫平末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 A A T T C A A T T C A A T T CG G G G A A T T CG A A T T C用同种限制酶切割C T T A A GC T T A A C T T A A GC T T A A C T T A A G G G基因的针线：DNA连接酶ATCAGTC二、分子缝合针——DNA连接酶DNA连接酶的作用过程：连接酶连接磷酸二酯键G作用部位：是磷酸二酯键（扶手）不是氢键（梯子） DNA连接酶将两条DNA链连接起来的酶。连接酶种类：作用分类E.coli DNA连接酶连接黏性末端T4DNA连接酶连接黏性末端和平末端DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？DNA连接酶DNA聚合酶连接DNA链双链单链将单个核苷酸加到已存在的核酸片断3’末端形成磷酸二酯键在两DNA片断之间形成磷酸二酯键连接部位CATATCGG核苷酸分子的连接：DNA聚合酶连接单链DNA把单个脱氧核苷酸连接到DNA片段上TATTAAATDNA聚合酶的作用A A T T GCDNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶返回三、分子运输车——基因进入受体细胞的载体 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去！能将外源基因送入受体细胞的工具就是载体。1、基