11DNA重组技术的基本工具_2.pptxVIP

设想一能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？设想二能否让细菌“吐出”蚕丝？设想三能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。1973年，美国科学家科恩将两种不同来源的DNA分子进行体外重组，并首次实现了在大肠杆菌中的表达，创立了定向改造生物的新技术——基因工程。专题1 基因工程1.1 DNA重组技术的基本工具科技探索之路 基础理论和技术的发展催生了基因工程从科技探索之路中可以看出： 说明没有 的研究成果，没有 的创新发明，基因工程不可能诞生，也不可能迅速崛起。基础理论技术阅读选修3《现代生物科技专题》的目录，找出现代生物科技包括哪些工程？基因工程、蛋白质工程、细胞工程、 胚胎工程、 生态工程一、基因工程的概念什么叫基因工程？ 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程实质结果DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平剪切→ 拼接→ 导入→ 表达基因重组（定向）新生物类型和生物产品基因工程的特点：①它是一种按照人们愿望，定向改造生物遗传特性的技术。 ②在DNA分子水平上进行操作。 ③是在体外进行的人为的基因重组。 ④一旦成功，便可遗传。 ⑤主要技术是体外DNA重组技术和转基因技术。转基因抗虫棉抗虫棉普通棉苏云金芽孢杆菌普通棉花(无抗虫特性)提取导入形成重组DNA抗虫基因棉花细胞(含抗虫基因)棉花植株(有抗虫特性)基因工程培育抗虫棉的简要过程：上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？关键步骤一：抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来关键步骤二：形成重组DNA关键步骤三：重组DNA导入受体(棉花)细胞解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？关键步骤一的工具：关键步骤二的工具：关键步骤三的工具：“分子手术刀”——限制性核酸内切酶“分子缝合针”——DNA连接酶“分子运输车”——运载体二、基因操作的工具（一）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（简称限制酶）切割DNA的工具是限制性核酸内切酶，又称限制酶。这类酶主要从原核生物中分离纯化出来的，迄今为止已从近300种不同的微生物中分离出了约4000种限制酶。限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。51432 T51423 A磷酸二酯键GCATATTATACG（一）限制性核酸内切酶—— “分子手术刀” 1、来源： 主要是从原核生物中分离纯化出来的。能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶。2、种类：4000种。3、作用：识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。黏性末端4、结果：形成两种末端平末端 大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ）能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。限制酶限制酶什么叫黏性末端？ 当限制酶在它识别的中心轴线两侧将DNA两条链切开时，切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，它们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。什么叫平末端？ 当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 DNA分子经限制性核酸内切酶切割产生的 DNA片段末端通常有哪两种形式？有黏性末端和平末端两种。那么，在中心轴线两侧的双链DNA上的碱基有什么特点呢？不管是产生黏性末端还是平末端，在中心轴线两侧的双链DNA上的碱基是旋转对称的。要想获得某个目的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？一个目的基因有几个黏性末端？要切两个切口，产生四个黏性末端，两个。如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端。是不是把两者的黏性末端黏合起来，这样就形成了重组的DNA分子了?实际还不够,还需要DNA连接酶进行连接。中轴线思考：①限制酶所识别的序列有什么特点？限制酶所识别的序列，都可以找到一条中心轴线，中心轴线两侧的双链DNA上的碱基是旋转对称的。②限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？一种限制酶只能识别和切断特定的核苷酸序列，这是由限制