沉默信息调节因子1基因敲除小鼠椎间盘软骨组织中胶原的动态变化.pdfVIP

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2021-09-14 发布于江苏
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沉默信息调节因子1基因敲除小鼠椎间盘软骨组织中胶原的动态变化.pdf

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第46 卷　第5 期贵州医科大学学报 Vol.46　No.5 2021 年5 月　　　　　　 JOURNAL OF GUIZHOU MEDICAL UNIVERSITY 2021.5 沉默信息调节因子 1 基因敲除小鼠椎间盘软骨组织 * 中胶原的动态变化* 夏晓枫，车彪，覃松，刘骏，罗斌** （长江航运总医院骨外科，湖北武汉　430014） [摘　要]目的　探讨沉默信息调节因子1（SIRT1）基因敲除小鼠椎间盘软骨组织中胶原的动态变化。方法　取 co／co ＋／＋＋／＋ 30 只Col2-CreSIRT1 （SIRT1 ）小鼠均分为正常组及模型组，另取15 只SIRT1 小鼠腹腔注射他莫昔芬获 -／- SIRT1 小鼠作为试验组，模型组、试验组手术建立椎间盘突出模型，正常组仅给予假手术操作；术后第4周时，采用Western blot法和实时定量PCR法检查3组小鼠椎间盘软骨组织中SIRT1 蛋白及mRNA 的表达水平，并行 HE染色及X线片检查观察小鼠椎间盘软骨组织学变化，采用免疫组织化学法检查术后第4、8及12周时3组小鼠椎间盘软骨组织中型胶原（Col ）、型胶原（Col ）及型胶原（Col X）的表达水平。结果　HE染色结 Ⅰ Ⅰ Ⅱ Ⅱ Ⅹ 果显示术后第4周，正常组小鼠椎间盘纤维结构清晰、层次分明，模型组小鼠纤维环排列欠完整、髓核细胞数目有所减少，试验组小鼠椎间盘纤维环明显紊乱，髓核细胞明显减少；X线片结果显示，正常组和试验组小鼠颈椎和腰椎段生理前凸角度均较模型组大；Western blot法和实时定量PCR检测椎间盘软骨组织的STRI1 表达结果显示，与正常组、模型组相比，试验组的SIRT1 蛋白及mRNA水平下降（P＜0.05）；术后第8周及12周时，3组小鼠椎间盘软骨组织Col 、Col X蛋白水平均高于术后第4周、Col 均低于术后第4周（P＜0.05）；同时点比较， Ⅰ Ⅱ 正常组小鼠各时点Col 和Col X均低于模型组和试验组（P＜0.05），试验组Col 和Col X均高于模型组（P＜ Ⅰ Ⅰ 0.05），Col 低于模型组（P＜0.05）。结论　敲除椎间盘模型小鼠的SIRT1 基因会使小鼠软骨组织中的Col 、 Ⅱ Ⅰ Col X水平升高和Col 水平降低。 Ⅱ [关键词]基因敲除技术；椎间盘；胶原；基因表达；沉默信息调节因子1；退变 [中图分类号]R681.533.1　　[文献标识码]A　　[文章编号]2096-8388（2021）05-0555-06 DOI：10.19367／ki.2096-8388.2021.05.010 Dynamic observation and analysis ofintervertebral disc collagen in mice with SIRT1 gene knockout