培养基制备地基本方法和注意事项.docxVIP

精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 培育基制备的根本方法和须知事项 1. 培育基配方的选定 同一种培育基的配方在不同著作中常会有某些差异；因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进展配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比拟核对．再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源； 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 |精. |品. |可. |编. |辑. |学. |习. |资. |料. * | * | * | * | |欢. |迎. |下. |载. 2 ．培育基的制备记录 每次制备培育基均应有记录，包括培育推各称，配方与其来源．和各种成份的牌号；最终 pH 值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录储存备查，复制记录随制好的培育基一同存放、以防发生纷乱； 培育基的各种成分必需精确称取并要留意防止错乱．最好一次完成，不要中断；可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧；完全称取完毕后．仍应进展一次检查； 培育基所用化学药品均应是化学纯的； 使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅， 以防有微量铜或铁混入培育基中，使细菌不易生长；最好使用不锈钢锅加热溶化．也可放入大烧杯或 大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流淌蒸汽消毒器中蒸煮溶化； 在锅中溶化时、 可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发觉有焦化现象、该培育基即不能使用，应重新制备； 待大局部固体成分溶化后，再用较小火力使全部成分完全溶化．迄至煮沸；如为琼脂培 养基，应先用一局部水将琼脂溶化，用另一局部水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合；在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，最终必需加以补足； 培育塞 pH 的初步调整 培育基各成分完全溶解后， 应进展 pH 的初步调正， 因培育基在加热消毒过程中、 pH 会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低 pH0.2. 而肠浸液 pH 却会有显著的上升；因此，对这个步骤，操作者应随时留意探究体会、以期能把握培育基的最终 pH ，保证培育基的质量； pH 调正后，仍应将培育基煮沸数分钟，以利培育基沉淀物的析出； 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 培育基的过滤澄清 液体培育基必需肯定澄清，琼脂培育基也应透亮无显著沉淀，因此，必要采纳过滤或其 它澄清方法以达到此项要求； 一般液体培育基可用滤纸过滤法， 滤纸应拆叠成折扇成漏斗形，以防止因液压不匀称而引起滤纸破裂； 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 |精. |品. |可. |编. |辑. |学. |习. |资. |料. * | * | * | * | |欢. |迎. |下. |载. 琼脂培育基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤； 亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过 滤；新制肉、 肝、血和土豆等浸液时、 如此须先用绒布将碎渣滤去， 再用滤纸反复过滤；如过滤法不能达到澄清要求、 如此须用蛋清澄清法； 即将冷却至 55- 60℃ 的培育基放入大的三角烧瓶内，装入量不得超过烧瓶容量的 1/ 2 ，每 1000ml 培育基参与 1-2 个鸡蛋的蛋白． 强力振摇 3-5 分钟， 置高压蒸汽灭菌器中、 121℃加热 20 分钟、 取出趁热以绒布过滤即可； 假如能自行沉淀者，亦可静置冰箱中 1-2 日、吸取其上清液即可； 培育基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内；分装量不得 超过容器装盛量的 2/ 3 ；容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外仍双用防水纸包扎 〔现试管一般多有用螺旋盖者〕；分装时最好能使用半自动或电动的定量分装器；分装 琼脂抖面培育基时，分装量应以能形成 2 / 3 底层和 1/ 3 斜面的量为恰当；分装容器 应予先清洗洁净并经干烤消毒， 以利于培育基的完全灭菌； 每批培育基应另外分装 20ml 培育基于一小玻瓶中，随该批培育基同时灭菌，以为测定该批培育基最终 pH 之用； 一般培育基可采纳 121℃ 高压蒸汽灭菌 15 分钟的方法；在各种培育基制备方法中，如无特别规定，即可用此法灭菌； 某些畏热成分，如糖类，应另行配成 20% 如或更高的浓液，以过滤或间歇灭菌法消毒， 以后再用无菌操作技术、定量加于培育基；明胶培育基亦应用较低温度灭菌；血液、体 液和抗生素等如此应从无菌操作技术抽取和参与于经冷却约 50℃ 左右的培育基中； 琼脂斜面培育基应在灭菌后立刻取出、待冷至 55- 60℃时，摆置成适当斜面、待其自然凝固； 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 9. 培育基的质量测试 每批培育基制备好以后．应认真检查一遍：如发觉破裂、水分浸入、色泽反常、棉塞被培育基沾染等、均应挑出弃去；并测定其最终 pH； 将全部培育基放入