甾体激素类药物分析.pptVIP

甾体激素类药物分析;概 述; 甾体激素类药物均具有环戊烷骈多氢菲母核，基本骨架为：; 常用的有氢化可的松、醋酸可的松、醋酸泼尼松等。;结构特点： ① A环3位为羰基、4，5位间为双键，形成共轭体系，标记为：Δ4-3-酮基（又称α、β不饱和酮结构），或写成: Δ4-C3=O； ② C环11位上有羰基或羟基； ③ D环17位上有α- 醇酮基侧链 （ ），并且多数还具α-羟基。 ;二、雄性激素及蛋白同化激素 （1）临床常用的雄性激素为睾丸素（睾酮）的衍生物，如丙酸睾丸素、苯乙酸睾丸素。 （2）常用的蛋白固化激素有苯丙酸诺龙（苯丙酸去甲睾酮）、康力龙、康复龙等。;（1）结构特征（两种激素之共同点）： ① A环3位Δ4-3-酮基（又称α、β不饱和酮结构）； ② D环17位上无侧链，多为羟基。;（三）孕激素 又称黄体素或孕酮，临床上主要为黄体酮、己酸孕酮、安宫黄体酮和甲地孕酮等。 ① A环Δ4-3-酮基（α、β不饱和酮结构）； ② D环17位上有甲基酮，有些具有羟基；;（四）雌激素 临床上常用雌二醇及其各种酯和炔雌醇及其衍生物，以及活性的雌酮、雌三醇等。 ① A环为苯环，3位上有酚羟基，10位无角甲基； ② D环17位上有羟基或羰基，有的还有乙炔基。;;第二节 鉴别试验;（二）官能团的反应 1、 C17 －α－醇酮基的反应 皮质激素C17-α-醇酮基具有还原性，能与许多氧化剂，如氨制AgNO3、斐林试剂、四氮唑盐反应。其中以四氮唑盐的显色反应最为常用，不但可用作层析法的显色剂，还可用于含量测定。;1、与碱性酒石酸铜试液反应 铜（Ⅱ）在碱性条件下可被还原物质还原为红色的氧化亚铜沉淀。如：中国药典鉴别氢化可的松;2、与氨制硝酸银试液的反应 银（Ⅰ）在碱性条件下可被还原物质还原为黑色的金属银沉淀。如：中国药典鉴别醋酸去氧皮质酮;3、与碱性四氮唑盐显色反应 氯化三苯四氮唑（或蓝四氮唑）在碱性条件下可被还原物质还原为红色的单甲鐕（或蓝色的双甲鐕）。;2、 酮基的呈色反应 机理：分子中C3 =O 和 C20 =O能与一般羰基试剂如：2，4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼等显色。主要是C3 =O 与异烟肼缩合生成异烟腙而呈黄色???; 盐酸酸性条件下： Δ4-3＝O：即刻反应 Δ1，4-3＝O ：1～3min C20＝O ：长时间;3、甲酮基或活性亚甲基的反应 含H3C-C=O（甲酮基）和活性亚甲基的激素类药物与亚硝基铁氰化钠、芳香醛、间二硝基苯反应呈色。 （1）甲酮基的呈色反应： 如黄体酮 蓝紫色，其它甾体呈淡橙色或不显色。（专属反应）;（2）亚甲基的反应： 如硫酸普拉睾酮 紫红色 ;4、酚羟基的呈色反应： A环为苯环的雌激素+重氮苯磺酸盐 红色偶氮染料。 例如：;5、炔基的沉淀反应 含炔基的甾体激素，如炔雌醇、炔诺酮，遇硝酸银试液，即生成白色的炔雌醇银盐沉淀及白色炔诺酮银沉淀。 6、卤素的反应（有机氟的呈色反应） 一些含有氟的甾体激素药物（如醋酸氟轻松、醋酸地塞米松等），以氧瓶燃烧后生成无机氟化物，再与茜素氟蓝及硝酸亚铈起呈色反应。;;（一）缩氨基脲的生成 如苯丙酸诺龙（甾酮）+ 缩氨脲 苯丙酸诺龙缩氨脲;三、紫外分光光度法 一些甾体激素药物分子中存在 和 共轭系统，在紫外光区有特征吸收。;四、红外吸收光谱;六、高效液相色谱法 在一定的色谱条件下，比较甾体激素样品与其对照品峰的保留时间进行鉴别。一般都规定在含量测定项下的高效液相色谱图中，供试品峰的保留时间进行应与对照品峰的保留时间一致。;第三节 特殊杂质检查;一、其它甾体的检查 我国药典和一些国家近版药典，采用TLC法或HPLC法检查甾体激素类药物中的“其它甾体”。因为该法具有简便、快速、灵敏、分离效果好等优点，而广泛用于甾体激素药物的鉴别、检查结构相似的杂质等质量控制的方法。 采用高低浓度对比法进行，即供试液与对照液均为同一物，但仅浓度有所不同。详见P251~252。 结果判断：中国药典正文中对供试品规定了杂质斑点数目和每个杂质斑点不得超过的限量。;;第四节 含量测定;一、高效液相色谱法 各国药典采用反相高效液相法测定，方法一般为内标法。填充剂为十八烷基硅烷化键合硅胶；流动相多为甲醇-水、乙腈-水-异丙醇、甲醇-四氢呋喃-水等混合溶剂；检测器均为紫外光检测器，检测波长为240nm或254nm。 为了提高分离效率、获得满意