4.3《酵母细胞的固定化》【公开课教案】设计.docxVIP

— PAGE \* Arabic 1 — 4.3《酵母细胞的固定化》【公开课教案】设计 专题4 酶的研究与应用  课题4.3 酵母细胞的固定化  一、【课题目标】  （一）知识与技能  1、识记固定化技术的常用方法  2、理解固定化酵母细胞的制备过程  3、知道固定化酶的实例  （二）过程与方法  1、固定化细胞技术  2、制备固定化酵母细胞的过程  （三）情感、态度与价值观  通过固定化技术的发展过程，培养科学探究精神，同时领会研究的科学方法  二、【课题重点】  制备固定化酵母细胞  三、【课题难点】  制备固定化酵母细胞  四、【教学方法】  启发式教学  五、【教学工具】  多媒体课件  六、【教学过程】  （一）引入新课  在应用酶的过程中，人们发现了一些实际问题：酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，提高了生产成本，也可能影响产品质量。在本课题中，我们将动手制备固定化酵母细胞，体会固定化酶的作用  （二）进行新课  1．基础知识  1．固定化酶的应用实例――生产高果糖浆  （1   （2）葡萄糖异构酶固定：将葡萄糖异构酶固定在颗粒状载体上，装入反应柱中。  （3）高果糖浆的生产操作（识图4－5反应柱）：  从反应柱上端注入葡萄糖溶液，从下端流出果糖溶液，一个反应柱可连续使用半年。  2．固定化技术的方法（识图4－6固定方法）：  将酶和细胞固定化方法有包埋法、化学结合法和物理吸附法。    〖思考1〗对固定酶的作用影响较小的固定方法是什么？吸附法。  〖思考2〗将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵过程变为连续的酶反应，应当固定（酶、细胞）；若将蛋白质变成氨基酸，应当固定（酶、细胞）。  3．固定细胞的材料：  固定细胞时应当选用不溶于水的多孔性载体材料，如明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等  2．实验设计  1．制备固定化酵母细胞  （1）酵母细胞的活化：  1g干酵母＋10mL蒸馏水→50mL烧杯→搅拌均匀→放置1h，使之活化。  〖思考3〗活化是指让处于休眠状态的微生物重新恢复正常生活状态的过程。  （2）配制CaCl2溶液：  0.83gCaCl2＋150mL蒸馏水→200mL烧杯→溶解备用。  （3）配制海藻酸钠溶液：  0.7g海藻酸＋10mL水→50mL烧杯→酒精灯微火（或间断）加热，并不断搅拌，使之溶化→蒸馏水定容到10mL。  〖思考4〗微火加热并不断搅拌的目的是什么？防止海藻酸南焦糊。  （4）海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合：  将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入活化酵母细胞液，搅拌后吸入到注射器中。  〖思考5〗为什么要海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞？  防止高温杀死酵母细胞。  （5）固定化酵母细胞：  以恒定速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中，形成凝胶珠状颗粒。  2．固定化酵母细胞的发酵  （6）冲洗：将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2～3次。  （7）发酵：150mL10％葡萄糖＋固定化酵母细胞→200mL锤形瓶→密封→25℃发酵24h。  〖思考6〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封？  酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。  〖思考7〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的？酵母菌进行无氧呼吸产生的。  〖思考8〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中，需要无菌操作码？  需要。  3．发酵操作    （四）实例探究  例1关于酵母菌的叙述，正确的是  A．酵母菌在营养物质充足时、环境适宜时，依靠有性生殖进行繁殖  B．酵母菌的代谢类型是异养厌氧型  C．酵母菌的生物膜系统包括细胞膜、核膜、各种的细胞器膜等膜  D．用酵母菌酿酒时，应先密封后通气  解析：酵母菌在环境适宜时进行出芽生殖，环境不良时进行孢子生殖。代谢类型为异养兼性厌氧型。酵母菌细胞为真核细胞，因此具有生物膜系统。在酿酒时，应当先通气后密封。  答案：C  例2研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的，如将大肠杆菌得到的三酯磷酸酶固定到尼龙膜上制成制剂，