化学发光免疫分析翻译.pdf

化学发光免疫分析 姓 名： 周金倩 学 号： 113138301 专 业： 环境科学 学 院：环境科学与安全工程学院 2009 年第 4 号第 28 卷，分析化学的趋势 化学发光免疫分析 赵丽霞，孙俪，褚晓刚 化学发光免疫分析（CLIA ）有几种潜在的优势，并且已经在临床医学、生物分析和环 境分析中应用。本文涵盖了 CILIA 在免疫学、CL 标记及相关技术和固相材料中的应用和最 新的进展。我们描述了 CLIA 的自动化、集成及小型化。我们评价了不同类型的CLIA 系统 并且预测了它未来的发展方向。 关键词：生物分析，化学发光免疫分析，化学发光标记，环境分析，免疫学，标记，制药分 析，毒理学分析 1. 导论 由于免疫分析（IA ）具有高灵敏度、高选择性、快速检测和不用广泛的治愈就能分析 困难的矩阵等优点，因而被广泛应用于制药分析、毒物分析、生物分析、临床医学和环境分 [1] 125 析中。1959 年，雅洛和博森 用 I 作为标记元素，继而放射免疫法（RIA ）被发明。虽然 RIA 方法可靠并精确，但是这种方法在放射性同位素方面的应用还不是很好，放射性同位素 限制这种方法必须施用专门的标记物。并且 125I 的半衰期较短[2,3] ，这也限制了放射免疫法 的普及。 酶联免疫分析方法（ELISAs ）比RIA 更安全、更容易，因而应用比较广泛。ELISA 是 以比色、荧光和化学发光（CL ）检测为基础的检测方法。然而，传统的比色法检测的灵敏 [4] [5,6] 度相对较低 。IA 具有非常高的检测灵敏度 ，因而被应用于检测方法中，这种方法依靠 的是特异性抗体（Abs ）的亲和力和检测方法的灵敏度。在检测方法中，CL 检测方法是在 生物技术领域应用范围较广的一个多功能的、超灵敏的工具。CL 方法替代了放射性的方法， 与 IA 的检测原理相结合用于检测分子（如蛋白质、激素、药物、核酸和环境污染物等）。 现在，CL 经常以一个 CL 标记物的形式或以一种酶或纳米粒子（NP ）的检测反应的形式用 于 IA 方法中。近年来，由于 CLIA 具有高灵敏度、宽的动态范围和完整的自动化等优点， 已被广泛的应用于临床医学和环境分析中。随着重组抗体（rAb ）技术、标记和相关技术、 固相材料、自动化的技术改进、集成化和小型化技术的应用和发展，CLIA 已经获得一个全 新的改观。 2.免疫识别 [7] 在过去，多克隆和单克隆 Abs(pAbs 和 mAbs)一直主导着 IA ，并且以后也会继续 。传 统上，Abs 可以从超免疫动物和杂交瘤细胞中获得。迄今为止，表１展示了 rAbs 在很多动 物体内提取（如兔子、羊、鸡和牛），这种提取方法相对比较便宜且提取量比较大，但是这 种提取方法会掺杂着结构相似的化合物和共存污染物，共存污染物用于分析以 pAb 为基础 的检测基质效应。 [8] 虽然 mAbs 通常由小鼠体内提取 ，但是它们拥有特异性结合的特点，并且是基于单克 隆抗体的检测，比基于pAb 为基础的检测更为敏感。生产单克隆抗体的主要缺点是它们很 [9] 昂贵并且产生和维持一个杂交瘤细胞株 要求的技术水平比较高。动物的免疫反应可以预先 确定单克隆抗体的结合特性并且在蛋白质水平上很难修改[10] 。然而，由于表达抗体片段的 分子方法和生产及筛选组合库技术的发展，目前已经开辟了一个比较宽的用于选择和设计 rAbs 的机会[11] 。rAbs 不需要结合骨髓瘤细胞就可以从各种动物体内提取。从动物体内提取 的抗体基因能够