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实验室标准操作技术常规 一、目的：根据病原微生物实验室生物安全管理条例的要求和相关规定制定本规程。 二、适用范围：病原微生物室的标准操作。 三、职责：使实验室人员规范操作技术，确保实验室人员生物安全。 四、程序： （一）标准微生物操作 1、实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。 2 、进行活体处理后，实验 人员要洗手消毒；离开实验室前脱手套。 3 、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专 用橱柜或冰箱中。 4 、不能用嘴移液、只能用机械装置移液。 5 、禁止使用锐器。 6 、所有的操作过程应尽量细心，避免产生溅出和气溶胶。 7 、实验完毕、下班前、活体溅出或溢出时，都应使用对病源有效的消毒剂进行台面消 毒。 8 、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，进行高压灭菌 103.4KPa （121.3℃）30 分钟，装入黄色塑料袋内，按医疗污物处理。 （二）特殊操作 1、在开展有关传染病源工作时，实验室主任应禁止或限制人员进入实验室。一般情况 下，易感人员或感染后会出现严重后果的人员，不允许进入实验室或动物房，例如，患 有免疫缺陷或免疫抑制的人，其被感染的危险性增加。 2 、实验室主任应制定规章和程序，只有告知潜在风险并符合进入实验室特殊要求（如， 经过免疫接种）的人，才能进入实验室。 3 、存在外源性病源时，实验室入口处应贴有生物危险标志，并显示以下信息：有关病 源、生物安全级别、免疫接种要求，研究人员姓名、电话号码、在实验室中必须佩带的 个人防护措施，出实验室所要求的程序。 4 、实验室人员接受适当的和实验室中处理或将要处理的病源有关的免疫接种或测试（如， 乙肝免疫接种或TB 皮试）。 5 、根据所处理的病源，适当时，收集和储存适合于实验室人员和有风险人员使用的基 本血清样品，根据所处理病源或设施的功能，应定期收集其他血清样品。 6 、对于有特殊风险的人员，要求阅读生物安全手册并在工作及程序上遵照执行。 7 、实验室主任保证实验及其辅助人员接受适当的培训，包括和工作有关的可能存在的 风险、防止暴露的必要措施和暴露评估程序。当程度必要改变时，有关人员必须每年更 新知识，接受附加培训。 8 8 、对于污染的锐器，必须时刻保持高度的警惕，包括针、注射器、玻片、加样器、毛 细管、手术刀。 9 、培养物、组织、体液标本，或具有潜在传染性的废物要放入带盖的容器中，以防在 收集、处理、储存、运输或装卸过程中泄露。 （三）安全设备（第一道屏障） 1、任何时候使用正确保养的生物安全柜、最好是二级生物安全柜、合适的人员防护设 施、或物理遏制装置。 1.1 确定可能形成传染性气溶胶或溅出物的实验过程，包括离心、研磨、匀浆、剧烈震 荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染病源的容器（容器内部的压力可能与大气压不一 致）、动物鼻孔接种、从动物或胚胎卵采集感染组织。 1.2 涉及高浓度或大体积的传染源时，若选用密封转头或带安全罩的离心机，若转头或 安全罩仅在生物安全柜中打开，则可以开放实验室内离心。 2 、当必须在生物安全柜外处理微生物时，需采取面部保护措施（眼镜、口罩、面罩或 其他防溅装置），以免传染源或其他有害物溅或洒在面上。 3 、在实验室内，必须使用专用的防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非实验室区 域（如咖啡屋、图书馆、门房）时，防护服必须留在实验室内。防护服可以在实验室内 处理，也可以在洗衣房中洗涤，但不能带回家中。 4 、可以接触潜在传染源、被污染的表面或设备时，要戴手套，戴两副手套更合适。明 显污染的手套要处理，当有关传染源工作结束时或手套损伤时，要弃去手套。一次性手 套不用清洗，不能重复使用，不能用于接触“洁净”的表面（键盘、电话等），也不应 当戴着到实验室外。 （四）实验室设备（第二道屏障） 1 、遏制病源的设备应该有带锁的门。 2 、新建实验 室选址要远离公共场所。 3 、每个实验室有一个洗手池。 4 、实验室设计要便于清洗，实验室内不适宜用地毯。 5 、实验台表面应能防水、耐热、 耐有机溶剂、耐酸碱。 6 、实验室的容器内部的压力台应能承受预期的重量并符合使用要求，实验台，安全柜 以及设备之间的空间应便于打扫。实验室使用的椅子及其它器具，应覆盖易于清洗的非 织物。 7 、安装生物安全柜时，要考虑到房间的通风和排风，不会导致生物安全柜超出正常参 数运行。生物安全柜应远离门、远离能打开的窗，远离行走区，远离其他可能引起风压 混乱的设备，保证生物安全柜气流参数在有效范围内。 8 、应有眼睛冲