面试题(微生物部分).pdfVIP

. 面试题（微生物检验部分） 一、简述聚合酶链式反应简称PCR 的工作原理？ 答：PCR 是一种体外DNA 扩增技术，是在模板DNA 引物和4种脱氧核苷酸 存在的条件下，依赖于DNA聚合酶的酶促合反应，将待扩增的DNA片段与其两侧 互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物延伸”三步反应的 多次循环，使DNA片段在数量上呈指数增加，从而在短时间内获得我们所需的大 量的特定基因片段。 1 PCR 由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成 2 PCR 反应五要素：参加 PCR 反应的物质主要有五种即引物、酶 dNTP 模板和Mg2+ 二、简述革兰氏染色法的原理及其操作步骤？ 答：革兰氏染色法的原理 G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性屏障，当乙醇脱色时，肽聚 糖脱水而孔隙缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。 G-菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙 醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红染液复染后呈红色。 革兰氏染色法一般包括初染 媒染 脱色 复染四个步骤，具体操作方法是： （1）载玻片固定。在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载 玻片上涂布均匀，在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。 （2）草酸铵结晶紫染1分钟。 （3）自来水冲洗，去掉浮色。 （4) 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。 （5）用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色30秒，革兰氏阳性菌不被 褪色而呈紫色，革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。酒精脱色为整个流程 最关键的一步。 （6）用蕃红染液或者沙黄复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性 菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。 三、食物中毒按病因分类分为哪几种？ 答：食物中毒常见的有以下几种： （1）细菌性食物中毒：沙门菌属食物中毒、变形杆菌食物中毒、腊样芽胞 杆菌食物中毒、致病性大脸杆菌食物中毒、肉毒棱菌食物中毒、葡萄 球菌肠毒素食物中毒。 （2）化学性食物中毒：误食有毒物质或食入被其污染的食物引起的食物中 毒，如某些金属、类金属化合物，亚硝酸盐和农药。 （3）有毒动物食物中毒：食入某些有毒动物或动物有毒 脏器而引起的食 物中毒。如河豚鱼、有毒鱼、贝类。 （4）有毒植物中毒：误食有毒植物或食入因加工不当而未除去有毒成分的 某些植物而引起的食物中毒，如毒蕈、木薯、友芽巧铃薯、四季豆 苦杏仁等中毒。 精品 . （5）真菌毒素和霉变食品中毒：如黄曲霉毒素、霉变甘蔗中毒。 如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！ 精品