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液相色谱;HPLC的环境设置:;一、色谱起源;液相色谱流程图;HPLC的分离类型;;;反相HPLC 色谱柱;流动相;溶 剂 等 级;HPLC用水可以通过以下几个方面来得到:;;溶剂前处理;
30mm内径:
适用于大进样量的过滤,由0.22μm和0.45μm两种规格,材料有纤维素,醋酸纤维,聚四氟乙烯。处理样品体积少于50μl。
13mm内径:
适用于范围广的过滤,由0.22μm和0.45μm两种规格,材料为纤维素。
3mm内径:
适用于小进样量的过滤,由0.22μm和0.45μm两种规格。处理样品体积为7μl。
;滤膜类型:
;溶剂前处理;柱塞往复泵;岛津VP系列输液泵;等度洗脱;梯度洗脱;;;;;进样器;HPLC六通阀进样器的使用及保养;工作原理;手动进样器的原理图;;;;;;进样体积 ;泵的保养;色谱柱;柱的保养:;流动相注意点;LC检测器;反相色谱分析时
添加10-30 mM 三乙胺(triethylamine) 可以抑制碱性化合物色谱峰拖尾
添加1% 醋酸acetic acid 可以抑制酸性化合物拖尾
三乙胺(triethylamine) 也用于正相色谱中,使硅胶部分去活性, 以获得化合物合适的保留时间;维护流程图;管线选择;管线材料;接头;吸滤头;单向阀;单向阀;单向阀清洗;故障1:宝石球粘附于垫片
表现:泵无法吸液或排液,流路不通
措施:1)用针筒抽出口单向阀以产生负压,使宝石球与垫片分开
2)拆下单向阀,放入异丙醇或水中,用超声波清洗;柱塞密封圈的更换;线路过滤器; ;;色谱柱柱效降低原因;滤片或填料堵塞;样品或流动相中杂质吸附;机械振动产生空隙;填料变性;产生峰变形(如拖尾等)的原因;溶解样品的溶剂选择不当;溶解性效应;机械振动产生空隙;紫外检测器;紫外灯的保养:;检测池清洗;检测池- 气泡 -;更换氘灯
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