生物化学标准化理论课件蛋白质的生物合成.pdfVIP

重庆医药高等专科学校 付凤洋 蛋白质合成体系 Protein Biosynthesis System 参与蛋白质生物合成的物质包括： ⚫ 三种RNA – mRNA – rRNA – tRNA ⚫ 20种氨基酸作为原料 ⚫ 酶及蛋白因子，如IF、eIF等 ⚫ ATP、GTP、无机离子 一、翻译模板mRNA及遗传密码 1961年，Nirenberg 证明 了mRNA的模板作用。 细菌＋矾土颗粒 轻轻研磨 细菌液 离心，去除细胞壁和膜 提取液（DNA、mRNA、tRNA、 核糖体、酶、离子） DNA水解酶，20种氨基酸等 蛋白质 蛋 白 DNase 质 合 成 量 时间 • mRNA是遗传信息的携带者 •遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子 （cistron）。 •原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单 位，转录生成的mRNA可编码几种功能相关的 蛋白质，为多顺反子 （polycistron）。 •真核生物一个mRNA只编码一种蛋白质，为单 顺反子 （single cistron）。 mRNA结构简图 ⚫ mRNA上存在遗传密码 mRNA分子上从5至3方向，由AUG开 始，每3个核苷酸为一组，决定肽链上某一 个氨基酸或蛋白质合成的起始、终止信号， 称为三联体密码 （triplet codon）。 从mRNA 5端起始密码子AUG到3端终止密码子之 间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一条多肽 链，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 ORF 编码区 5 3 7 AUG UAA m Gppp AAA……An 5非翻译区 3非翻译区 遗传密码的破译 提取液（DNA、mRNA、tRNA、核糖 体、酶、离子） 保温 蛋白质合成停止 poly U，ATP ，GTP，氨基酸 多聚苯丙氨酸 （UUU是Phe的密码子） 同样方法证明了CCC是Pro的密码子， AAA是Lys的密码子。 密码子的第二个字母 遗 传 密 密 码 码 子 表 的 第 一 个 字 母 氨基酸的活化 第一步反应 氨基酸＋ATP ＋E —→氨基酰-AMP-E＋AMP ＋PPi 第二步反应 氨基酰-AMP-E ＋ tRNA ↓ 氨基酰-tRNA ＋ AMP ＋ E •氨基酰-tRNA合成酶对氨基酸和tRNA都有高度特 异性。 •氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proof-