第十章动物实验的基本技术和方法.pptxVIP

第十章 动物实验的基本技术和方法; 在医学教学、科研和医疗工作中，不论是从事基础医学还是临床医学或预防医学，都需要用实验动物来进行各种实验。通过对动物实验的观察、分析，来研究需要解决的问题，动物实验方法已成为研究工作中必不可少的重要手段。;动物实验 整体实验:LD50、活存时间、活存率 离体实验:器官灌注、组织切片、细胞培养 急性实验：急毒，1～2天 亚急性实验：药效，1～4周 慢性或长期实验：长毒、“三致”、转基因动物, 3～6个月;动物实验前的准备 一、动物的购入 购入或领取实验动物时，实验人员应向供应部门索取所用动物相应等级的由国家主管部门所颁发的质量合格证书，动物的遗传背景资料、动物微生物检查资料及动物年龄和健康等方面的资料。 若是购入或领取清洁级以上实验动物，应采用带有空气过滤膜的无菌运输罐或带过滤帽的笼盒运输，并严格检查其密封状况。 ;动物外观健康检查主要内容： ①皮毛：有无光泽、出血、干燥； ②眼：有无眼屎、流泪、白内障、角膜损伤等； ③耳：有无外伤、耳壳曲折、中耳炎等； ④四肢：有无弯曲、脱臼、外伤、关节炎； ⑤肛门：有无下痢、血便、脱肛等。; 二、动物饲养室及饲养器具准备 饲养室面积应根据所购入动物的数量来确定。饲养动物的器具等，应在动物购入前准备好。垫料、饲料应按购入动物数量准备。各笼箱的编号及卡片、饲喂动物所用器材，如给饵器、粪便托盘、搬运车、台秤、饲料桶、电源插板等也应准备放好。动物饲养室的环境应根据所计划使用动物的微生物控制级别来进行准备，属于屏障系统的应调整好送排风系统、空气净化系统，控制好温度、湿度、风速、噪声等环境因素。动物饲养室在启用前，应对设施、笼具及用具等统一进行彻底消毒。 ;编号标记 目的：为了分组 要求：清晰、耐久、简便、适用;颜料标记 颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的编号。常用的颜料有 5%苦味酸溶液 (黄色) 2%硝酸银溶液 (咖啡色) 0.5%中性品红溶液 (红色) 煤焦油的酒精溶液(黑色)。 编号原则：先左后右，从??而下。;小鼠和大鼠标号示图;烙印 用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号，然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。;纹身 用刺数钳在局部皮肤(兔多在耳朵内侧，猴多在前胸皮肤)刺上号码，再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺号，多用于猴、兔的编号。;号牌 将不锈钢或铝质号牌固定在狗或猴的链条或颈圈上。兔号牌则固定在耳朵上。少量动物时也可将号牌挂在笼具上，但应防止抓取操作后将动物放错笼具而混淆编号。 ; ;动物被毛的去除 为了排除动物被毛对实验操作和观察结果的影响，实验中需要去除或剪短动物的被毛。;剪毛法 拔毛法 剃毛法 脱毛法 ;脱毛剂 1) 8%NaS NaS 8g+水至100ml；也可用硫化钠8克、淀粉7克、甘油4克、硼砂1克，用自来水加至100ml。 常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。上述配制好的溶液5～7ml可用于 15×12cm2皮肤的脱毛。 2) 10%NaS 硫化钠10克、氧化钙15克，自来水加至100ml。常用于狗、猪等较大动物的皮肤脱毛。 3) 硫化硷 染土布用硫化硷10克，生石灰15克，加自来水至100ml溶解后即可应用。常用于实验狗的皮肤脱毛，涂上脱毛剂2～3分钟狗毛即可成糊状，迅速用自来水将局部脱毛皮肤冲洗干净。此方法脱毛干净，脱毛后局部皮肤不充血。;目的：防止动物挣扎，保持安静 防止意外损伤，便于操作 ;全身麻醉;麻 醉 剂 ;20;局部麻醉 1%盐酸普鲁卡因，局部注射 2%盐酸可卡因，粘膜表面麻醉;急救 原因：麻醉过量、大失血、窒息 措施：人工呼吸 强心剂：0.1%肾上腺素 呼吸兴奋剂：尼可杀米 山梗菜碱 快速输血、输液;动物的抓取与固定方法 目的：限制动物的活动，持安静状态 以便正确操作和记录 要求：不损伤实验动物 不影响观察指标 实验者不被动物咬伤 保证实验顺利进行 小心细致、大胆敏捷，切忌粗暴。; 小鼠的抓取;小鼠的抓取保定： 器材：小鼠饲养盒+盒盖1套。 方法步骤： 1、用右手拇指和食指捏 住小鼠尾巴中部将小鼠提 起，放在饲养盒盖上。 2、用左手拇指和食指迅速、 准确地捏住小鼠的两耳后、 颈背部的皮肤，将小