第2章--氨基酸与蛋白质的一级结构.pptVIP

2021/9/12 * 2021/9/12 * 第五节 蛋白质一级结构的测定 定义—— 1969年,国际纯化学与应用化学委员会（IUPAC） 规定:蛋白质的一级结构指蛋白质多肽连中AA的排列顺序,包括二硫键的位置。 2021/9/12 * F. Sanger (1953, Cambridge U) Insulin 胰岛素 (A, B chains) 以传统氨基酸定序法决定蛋白质序列 S S S S S S +NH3 NH3+ -OOC Q G I V E Q C C T S I C S L Y L E N Y C N COO- F S F V N Q H L C G H L V E A L Y L V C G E R G F Y T P K T B-chain A-chain 2021/9/12 * 一）、Edman degradation降解法测定氨基酸顺序的一般测定步骤 （1） 测定多肽链的数目,拆分多肽链,分析多肽链的N末端和C末端残基 （2）断裂多肽链内、间的二硫键 （3） 测定每条多肽链的AA组成 （4） 多肽链断裂成小肽段 （5） 测定各个肽段的AA顺序 　　　　 （6） 确定肽段在多肽链中的次序（7） 确定原多肽链中二硫键的位置 2021/9/12 * Sanger法。2,4-二硝基氟苯在碱性条件下,能够与肽链N-端的游离氨