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专题 1 基因工程
1.1 DNA 重组技术的基本工具
一、教学目标
1、简述 DNA 重组技术所需三种基本工具的作用
2 、认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新
二、教学重点和难点
1、教学重点
DNA 重组技术所需的三种基本工具的作用
2 、教学难点
基因工程载体需要具备的条件
三、教学过程
1、基因工程的原理:基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外 和
,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于
基因工程是在 水平上进行设计和施工的,因此又叫做 。
2 、限制性核酸内切酶
(1)切割 DNA 的工具是 ,又称 。
(2 )这类酶在生物体内能将外来的 DNA切断,即能够限制异源 DNA的侵入并使之失去活力,但对自
己的 DNA却无损害作用,这样可以保持细胞原有的遗传信息。
(3 )由于这种切割作用是在 DNA 分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶(简称限制酶) 。
(4 )DNA 分子经限制酶切割产生的 DNA 片段,末端通常有两种形式,即 和 。
例 1、下列关于限制酶的说法正确的是( )
A 、限制酶广泛存在于各种生物中,但微生物中很少
B 、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C 、不同的限制酶切割 DNA 后都会形成黏性末端
D 、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键
3 、DNA 连接酶——“分子缝合针”
根据 DNA 连接酶的来源不同,可以将它分为两类:
一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为 E coli DNA 连接酶。 E coli DNA 连接酶只能将
连接起来,不能将双链 DNA 片段平末端之间进行连接。
另一类是从 分离出来的, 称为 T4 DNA 连接酶。 T4 DNA 连接酶既可以 “缝合”
双链 DNA 片段互补的 ,又可以“缝合”双链 DNA 片段的 ,但连接
之间的效率比较低。
例 2 、下图为 DNA 分子的切割和连接过程。
1
(1)EcoRI 是一种 酶,其识别序列是 ,切割位点是 与
之间的 键。切割结果产生的 DNA 片段末端形式为 。
(2)不同来源 DNA 片段结合,在这里需要的酶应是 连接酶,此酶的作用是在
与 之间形成 键,而起“缝合”作用的。还有一种连接平末端的连接酶是
。
答案:限制酶 GAA TTC 鸟嘌呤脱氧核苷酸 腺嘌吟脱氧核苷酸 磷酸二酯键 黏性末端
E co l i
DNA 鸟嘌呤脱氧核苷酸 腺嘌吟脱氧核苷酸 磷酸二酯键 T DNA 连接酶
4
4、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
(1)基因操作过程中使用载体两个目的:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;
二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。
(2 )现在通常使用的载体是 ,它是一种相对分子质量较小、独立于
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