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食品微生物的检测能力验证 能力验证（proficiency testing ）即利用实验室间比对，按照预先制定的准则 评价参加者的能力。通过能力验证能够评定实验室从事特定检测或测量的能力， 识别实验室存在的问题并启动改进措施，提高实验室的检测能力等。因此，参加 能力验证活动对实验室质量控制有着非常重要的意义。上海市闸北区疾病预防控 制中心实验室已连续多年参加辽宁出入境检验检疫局食品微生物能力验证计划， 现将从中收获的一些经验教训介绍如下，供同行参考。 1.2.2 操作步骤 ① 按照PTC-T028 参试指导书的要求进行样品水化。从冰箱取出待测样品， 待其恢复至室温后，无菌开启装有样品的西林瓶，立即加入4 mL 生理盐水进行 再水化，稀释液合计40 mL ，待溶解后，吸出放入无菌瓶中，反复用余下的稀释 液清洗西林瓶内壁，回收清洗液放入上述无菌瓶中，此溶液即是待测样品原液， 全过程20 min 内完成。将上述制备的40 mL 待测原液按照标准方法进行后续操 作。 ② 菌落总数检测。取经水化制备的待测原液25 mL，加入225 mL 灭菌生理 盐水混匀，制成10-1 稀释液，取10-1 稀释液1 mL 加9 mL 灭菌生理盐水混匀， 制成 10-2 稀释液，以此类推稀释至 10-4。每稀释1 次，换1 次无菌吸管。每个 稀释度样液各取1 mL 加入到2 个无菌平皿中，同时做空白对照。及时用15 mL 冷却至 45 ℃左右的平板计数琼脂倾注平皿，摇匀，待培养基凝固后倒置放入培 养箱中，36℃培养48 h 后进行菌落计数。 ③ 大肠菌群检测。采用最可能数（most probable number，MPN ）法进行大 肠菌群计数。将经水化的待测样品按照菌落总数检测的方法制备 10-1～10-6 的 稀释液。每个稀释度接种3 管LST 肉汤，每管接种1 mL，36℃培养48 h 后，产 气者进行复发酵试验，接种BGLB 肉汤管36℃培养48 h 后产气者计为大肠菌群 阳性，记录每个稀释度的BGLB 产气管数。 ④ 金葡菌检测。取经水化制备的待测原液25 mL ，加入225 mL 7.5%NaC1 肉汤制成混悬液，于36℃培养20 h ，转种血平板和Baird-Parker 平板，于36℃ 培养24 h，挑取可疑菌落进行鉴定。 ⑤ 沙门菌检测。取经水化制备的待测原液25 mL ，加入225 mL BPW 制成 混悬液，于36℃培养18 h 后，分别取1 mL 转种TTB 10 mL 及SC 10 mL，TTB 置42 ℃培养24 h ，SC 置36℃培养24 h ，分别转种BS 平板内于36℃培养48 h 及沙门菌属显色平板，于36℃培养24 h，挑取可疑菌落进行鉴定。 ⑥ 单增检测。取经水化制备的待测原液25 mL，加入225 mL LB1 制成混悬 液，于30℃培养24 h 后，吸取0.1 mL 转种于10 mL LB2 中，置30℃培养24 h， 转种于PALCAM 平板和李斯特菌显色平板，36℃培养48 h ，挑取可疑菌落进行