如何制作检验科质控图.ppt

* * * * 如何制作检验科质控图 第一页 质控血清 1．内部对照质控血清 2．外部对照质控血清 外部对照质控血清是各级实验室为了监控每次检测的重复性和稳定性以及检验试剂盒批间差异而设置的一套阴性和阳性对照血清。设立外部对照还可以提示标本处于临界值状态时的检验操作情况。 第二页 （1)外部对照质控血清的组成 理想的外部对照应该包括阳性对照、弱阳性对照、临界值对照和阴性对照。 在每次实验时应设置一个单一浓度水平的质控品即弱阳性对照。这个弱阳性对照的值以设定在该试剂盒Cut-off值的2－3倍为宜。 第三页 （2）外部对照质控血清的来源和选择 1）通过向有关机构购买获得 2）通过实验室制备获得 ( 比较经济的方法 ) ① 混合试剂盒内部对照血清，等量分装。 ② 混合HIV抗体阳性或阴性人血清，3000转/分钟离心15分钟，用0.2?m 生物滤膜过滤除菌后再进行56 ℃30分钟加热灭活处理。弱阳性对照可以通过使用HIV抗体阴性的正常人血清梯度稀释HIV抗体强阳性血清并经标定后得到。弱阳性对照的OD值以2－3倍于Cut-off为宜。 第四页 （3）外部对照质控血清的保存 1）外部对照血清或血浆的一次制备量应该足够本实验室一年使用 2）外部对照血清应该均一、无菌 3）外部对照血清标定后应该等量分装，每个分装的量应足够一周使用 4）外部对照应该分类作好标记，使用不同颜色的标签 5）外部对照血清应该存放在－70 ℃，如无条件则存放在非自动除霜的－20 ℃冰箱 6）外部对照血清一旦融解以后应该存放在 2－8 ℃，一周后必须弃去，不能重新冻存。 第五页 （4）外部对照质控血清的使用 原则上每一次实验必须使用外部对照质控血清，建立质控图，以便监控实验操作的一致性和结果的准确性。同时可以了解各批试剂盒之间的误差(批间差异)。 第六页 质控图(1) X X+S X-S X-2S X+2S 第七页 建立质控图参数 对HIV抗体检测(ELISA)外部对照质控血清的评价采用多次测定的OD值的均值上下各两个标准差的范围，即外部对照OD值的95％可信限为 x ? 2s。各个外部对照的标定即确定外部对照的均值和可信限， 可用下列几个统计学参数来确定可信限: ① 算术平均值( x )代表一组OD值数的平均值。 ② 标准差(s) ③ 变异系数(cv)， 第八页 次数 质控血清 OD Cut-off值 OD S/CO值 1 0.180 0.105 1.71 2 0.190 0.105 1.81 3 0.200 0.105 1.90 4 0.228 0.105 1.81 5 0.137 0.105 1.09 6 0.221 0.105 2.10 7 0.150 0.105 1.43 8 0.170 0.105 1.62 9 0.180 0.105 2.14 10 0.150 0.105 1.43 11 0.200 0.105 1.90 12 0.142 0.105 1.35 13 0.210 0.105 2.00 14 0.221 0.105 1.52 15 0.180 0.105 1.71 16 0.190 0.105 1.81 17 0.160 0.105 1.52 18 0.221 0.105 2.10 19 0.210 0.105 2.00 20 0.150 0.105 1.43 ? 范例：参考郑怀竞主编《免疫学检验室间质评与室内质控》，1997年出版。? 第九页 x 计算公式为： Σx x = ── N s 计算公式为： ─────── ∑( xn - x )2 s = ─────── N cv 计算公式为： s cv = ── x 100 % x 第十页 通过上表，计算S/CO值的均值（x），标准差（s）和变异系数（cv） x =1.72 s =0.29