发酵工程的应用范围.docVIP

Word文档下载后可自行编辑修改很方便 PAGE1 / NUMPAGES1 发酵工程的应用范围 篇一：发酵工程范围答111-0 1、 了解菌种分别的思路，及方法。 分别思路： 新菌种的分别是要从混杂的各类微生物中依照生产的要求、菌种的特性，采纳各种筛选方法，快速、精确地把所需求的菌种选择出来。一般的菌种分别纯化和筛选步骤可分为采样、增殖与分别、发酵与性能测定等几个步骤。 方法： ① 定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生长培育特性。 ② 采样：有针对性地采集样品。 ③ 增殖：人为地通过掌握养分或培条件，使所需菌种增殖培育后，在数量上占优势。 ④ 分别：利用分别技术得到纯种。 自然界分别微生物的一般操作步骤：样品的实行→预处理→培育→菌落的选择→初筛→复筛→性能的鉴定→菌种保藏 2、 菌种退化、复壮 菌种退化：指整个菌体在多次接种传代过程中渐渐造成菌种发酵力（如糖、氮的消耗）或繁殖力（如孢子的产生）下降或发酵产物得率降低的现象。 菌种的复壮:指使衰退的菌种复原原来优良性状。狭义的复壮是指在菌种已发生衰退的状况下，通过纯种分别和生产性能测定等方法，从衰退的群体中找出未衰退的个体，以达到复原该菌原有典型性状的措施。 3、 菌种育种的方法。 菌种选育方法： 1.自然选育：生产中依据菌种自发突变的特点进行菌种筛选的过程。 方法：①通过表现形态来淘汰不良菌株。常采纳单菌落分别法。②通过目的代谢物产量考察。③进行遗传基因型纯度试验。④传代的稳定性试验。 2.诱变育种：用各种物理、化学因素人工诱发基因突变进行的筛选，称诱变育种。 3.高产突变株的筛选：①依据形态特征筛选：依据菌落和菌体（包括菌丝体、孢子）的形态突变筛选可见的高产突变株。②依据代谢调整特点筛选：依据微生物的代谢调整机制来选择特定的突变体。③依据其他生理特性筛选： 4.体内基因重组育种：指重组过程发生在细胞内。即采纳转化、转导、接合和原生质体融合等遗传学方法和技术，使微生物细胞内发生基因重组（染色体或基因的重新组合），转变遗传物质的成分、数量和结构，从而获得优良菌株的一种育种方法。 5.DNA 体外重组技术(in vitro recombination DNA technology)（基因工程技术）：依据需求用人工方法取得供体DNA 上的基因，在体外重组于载体DNA 上，再转移入受体细胞，使其复制、转录和翻译，表达出供体原有的遗传性状。 4、简述工业化菌种的要求 1) 能够利用廉价的原料，简洁的培育基，大量高效地合成产物 2) 有关合成产物的途径尽可能地简洁，或者说菌种改造的可操作性要强 3) 遗传性能要相对稳定 4) 不易感染它种微生物或噬菌体 5) 产生菌及其产物的毒性务必考虑（在分类学上最好与致病菌无关） 6) 生产特性要吻合工艺要求 4、 培育基—菌体生长所需的养分以及其它务必的条件 碳源：用于供应菌种生命活动所需的能量和构成菌体细胞以及代谢产物的物质基础。通常用作碳源的物质有糖类、脂肪、及某些有机酸。霉菌和放线菌均可利用脂肪和某些有机酸作为碳源。 氮源：用于构成菌体细胞物质和代谢产物，即蛋白质及氨基酸之类的含氮代谢物，通常所用的氮源可分为有机和无机氮源。有机氮源：花生饼，鱼粉，酵母粉；无机氮源：氨水，尿素，硝酸钠等。 无机盐：构成菌体的成分，作为酶的组成部分或维持酶的活性，调姐渗透压、PH值，氧化还原电位等。微生物生长发育和生物合成过程需求铅、镁、磷、硫、铁、钾、钠、氯、锌、钴、锰等无机盐类与微量元素。 特别生长因子：构成辅酶的组成部分，促进生命活动进行。包括：生物素、硫胺素、对氨基苯甲酸、肌酸等，需求量极少。 水：生长必需，微生物所需的养分物及代谢产物务必溶解于水中，才能通过细胞膜被汲取或排出。体内各种生化反应也务必在水溶液中进行。 5、 了解种子扩培的工艺过程及其中的基本概念如种子培育基。三级种子罐扩大培育 发酵罐 培育基依据生产工艺的要求可分为孢子培育基、种子培育基和发酵培育基三种。孢子培育基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培育基，对这种培育基的要求是能使菌 体快速生长，产生较多优质的孢子，并要求这种培育基不易引起菌种发生变异。种子培育基是供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体，并使菌体长得粗大，成为活力强的“种子”。发酵培育基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能快速生长，达到肯定的菌丝浓度，