母种培养基的配制.docx

母种培养基的配制 This manuscript was revised by JIEK MA on December 15th, 2012. 实验一母种培养基的配制 一、 目的要求： 1、 了解母种培养基制作过程，理解灭菌原理； 2、 掌握母种培养基的制备方法； 二、 主要仪器设备及药品材料： 试管（若干个）、刀、砧板、天平、电磁炉，铝锅、棉塞（或硅胶塞）、纱布、 烧杯、量筒、马铃薯、琼脂、葡萄糖、高压灭菌锅 三、 实验步骤与方法： 1 PDA培养基配方 马铃薯200克,葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升. 母种培养基的配制 （1）熬制。马铃薯洗净，挖芽去皮。称取200克，切成玉米大小颗粒或薄片。量筒 量取1000亳升水，铝锅中煮沸后记时30分钟。四层纱布过滤于量杯中。滤液倒入锅 中文火加热，加入葡萄糖和琼脂，不断搅拌，直到琼脂溶化。补足水量至1000毫 升。 （2）调节PH值。 （3） 分装试管。将熬制的培养基用小漏斗趁热分装。培养基高度为试管长度的1/5 左右，注意避免培养基沾于试管口外。分装完成后，盖紧硅胶塞。 （4） 捆把。7支试管为一捆，用牛皮纸包裹试管口，用捆扎绳扎紧。贴上标签， 准备灭菌。 （5） 灭菌。注意加足水量和排气，灭菌完成后降压不能太快。 （6） 摆斜面，培养基长度约为试管长度的1/2。斜面试管上覆盖洁净的厚毛巾或 凡层纱布，防止试管内产生过多的冷凝