喜树碱的药物设计靶向癌细胞死亡与基因.ppt

例如，抗叶酸药物甲氨蝶呤（MTX），它作为一种叶酸还原酶抑制剂，主要抑制二氢叶酸还原酶而使二氢叶酸不能还原成有生理活性的四氢叶酸，从而使嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的生物合成过程中一碳基团的转移作用受阻，导致DNA的生物合成受到抑制。主要用于儿童急性白血病和绒毛膜上皮癌，可作为免疫抑制剂应用。 第二十七页，编辑于星期三：二十一点 三十分。 喜树碱的药物设计靶向癌细胞死亡与基因 喜树碱的药物设计靶向癌细胞死亡与基因喜树碱的药物设计靶向癌细胞死亡与基因 第一页，编辑于星期三：二十一点 三十分。 1.引言 喜树碱是四十多年前发现一种植物抗癌药物。拓扑异构酶Ⅰ是一种非常重要的DNA操作酶，是唯一知道的喜树碱的靶点，它结合在共价蛋白核酸复合物的界面。这主要与喜树碱的化学与生物学的三个方面有关：一是以拓扑异构酶Ⅰ为靶点合成的喜树碱抗肿瘤衍生物，二是由拓扑异构酶Ⅰ抑制剂诱导的细胞死亡机制，三是拓扑异构酶Ⅰ抑制剂靶点所对应的特定的DNA序列。作为设计抗癌药物的首选天然产物，或是作为研究拓扑异构酶Ⅰ对DNA新陈代谢的实验工具。 第二页，编辑于星期三：二十一点 三十分。 第三页，编辑于星期三：二十一点 三十分。 20-(S)-Camptothecin (CPT)最早是在1966年，由美国的Wall等从中国特有的珙桐科植物喜树中提取到的，由美国国立肿瘤研究所（NCI）动物模型上证实其抗肿瘤作用，并将其水溶性钠盐用于临床试验。在过去的四十年，从大量的植物科中发现了这种单萜吲哚类生物碱，包括茜草科、夹竹桃科、钩吻科、茶茱萸科等。 尽管有抗肿瘤的活性，但是后来发现碱处理开环后药物活性明显下降，同时还伴随着严重的毒性反应——包括严重的腹泻、出血性膀胱炎，使得CPT类化合物的临床研究就此中断。1985年发现CPT特异作用于核内蛋白拓扑异构酶Ⅰ。二十年后，拓扑异构酶Ⅰ仍是已知的CPT的唯一靶点，这使得这种生物碱成为真正的靶点抗癌制剂。 第四页，编辑于星期三：二十一点 三十分。 2.喜树碱：拓扑异构酶Ⅰ-DNA复合体的分子钳 DNA拓扑异构酶Ⅰ是生物体内及其重要的细胞核内酶，参与DNA复制、转录、重组和修复等所有关键的核内过程。拓扑异构酶Ⅰ为单体性100kDa的多肽，由染色体20q12~13.2位基因编码，可松解过度卷曲的DNA双链，以利于复制及转录的进行。酶先与DNA结合，成为可断裂复合物，在DNA磷酸二酯键上形成一个单链缺口，让未受损的单链从缺口中回转，使DNA松弛，以利于复制或转录，随后将缺口连接。 第五页，编辑于星期三：二十一点 三十分。 CPT类化合物的作用机制是参与TopoⅠ作用过程中与DNA形成的“可切割复合物”，阻碍DNA链的闭合，导致细胞DNA单链断裂（SSB），这种单链断裂对细胞来说并不是致死性的，当可切割复合物与正在进行复制的DNA复制又相遇时，会继发性的造成不可逆的DNA双链断裂（DSB），最终引起细胞死亡。 因此，S期细胞对CPT类化合物特别敏感。另外，CPT稳定的可切割复合物也作用于RNA聚合酶的转录过程，抑制RNA的合成，在DNA模板链形成不可逆的单链断裂，并在启动子区域引起少量双链断裂。 第六页，编辑于星期三：二十一点 三十分。 3. CPT衍生物的设计：永无止境 根据在A-B、C-D、E环上取代基位置的不同，可以将CPT衍生物分成三类。 第一类：A-B环的修饰。早期发现，A-B环被取代后不丧失活性。这个二元环上可以被许多官能团取代，特别是在7位、9位和10位上，尽管会保留甚至在某些情况下会提高天然产物的细胞毒性。当前已经研发了两种主要的抗癌药——拓扑替康和伊立替康，并且已经用于临床。 第七页，编辑于星期三：二十一点 三十分。 拓扑替康（TPT），又名拓泊替康、和美新，结构如图。本品为CPT半合成衍生物，作用靶点为TopoⅠ，为S期抗肿瘤药。临床前研究表明，TPT抗肿瘤谱较广，对L1210和P338白血病小鼠的活性及在体内抗Lewis肺癌和B-16黑色素瘤的作用均优于CPT。在人结肠癌异体移植物，TPT可以诱导肿瘤消退及延缓其生长。1996年，美国FDA批准其为治疗卵巢癌的二线药物。2000年，被批准为治疗小细胞肺癌的二线药。 第八页，编辑于星期三：二十一点 三十分。 不良反应：1.骨髓抑制：中性粒细胞下降、血小板减少、贫血等，为主要限制性毒性。2.胃肠道反应：恶心、呕吐、腹泻、便秘、肠梗阻、腹痛、口腔炎、厌食等。3.皮肤反应：脱发，偶见严重的皮炎及瘙痒。4.神经肌肉反应：头痛、关节痛、肌肉痛、全身痛、感觉异常。5.呼吸系统反应：可致呼吸困难。 6.肝脏：有时出现肝功能异常，转氨酶升高。7.全身反应：乏力、不适、发热等。8.局部刺激：静脉注射时，若漏出血管外可产生局部刺激、红肿。 第九页，编辑