实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察.docVIP

实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察 姓名：李思專 学号：131140040 —、实验目的 通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察，加深理解细胞吞噬作用的过程； 了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法 二、实验原理 吞噬作用也称为胞吞作用(cellular caring),指细胞通过质腹内陷形成內吞泡的方式 吞入不能渗透过朕的较大囱体物质(賣径一般大于250mm)的过程。许多原生动物通 过吞噬作用摄取营养；高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物 体非特异性免疫的重要组成部分。不同动物来源的巨噬细胞或同一动物来源的不同巨 噬细胞吞噬功能强弱不同，个体吞噬细胞的平均吞噬能力是机体非特异性免疫功能强 场的重要反映。 吞噬细胞细胞朕上有识别某些病原体相关分于氏凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的 受体，可以便巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞疋其它异物，引起受体胞內区活化, 进而导致与其相连的细胞借架重排引发吞噬作用。 Exocytosetl clegradetl material 巨噬细胞吞噬自身衰老凋亡细胞而不吞噬正常细胞，原闵是，凋亡细胞细胞朕内 侧而的磷脂酰丝氨酸反转到胞膜外侧面而被巨噬细胞挨式识别受体识别。 CytopUwiCytopiam横郦Wi CytopUwi Cytopiam 横 郦Wi榔 Apoptosis 吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指數两个指标反映。 吞噬百分率=吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总數X100% 吞噬指数=吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸭红细胞的巨噬细胞数 三、 实验材料、试剂及器材 （1）材料： 健康小白鼠：6-8周龄健康小白鼠，实验前1~2天，每只腹腔注射4%淀粉肉汤ImL。 抗凝玛血 （二） 试剂： 4%淀粉肉汤 D-Haiiks 液 0.85%生理盐水 180lU/mL肝素钠生理盐水溶液 （三） 用品 普通光学显微镜.10mL低速离心机、托捉天平.水浴箱（37°C）. 5mL-次性注射器. WmL玻璃离心管、试管架、胶头滴管等 四、 实验操作 巨噬细胞收集：脱颈处死小鼠；腹腔注入2mL生理盐水，探匀；剪开腹部皮肤， 暴專腹膜；用带针头的注射器插进腹腔呎取腹腔液。 2? 体外吞噬。0.3mL腹腔液+0.3mL鸡红细胞悬液，37°C吞噬。 3? 刖片氏观察。分别在OmiiK 15min. 30min 45min制备细胞混合液临时装片，观 察现象并作图。 五、 实验结果 图1小庶喪腔叵嚎细胞吞噬鸡血红细胞装片（不染色） 肘 间 Omin 15min 30min 45min 现 ■at右 叙 * 、 ? 丧1巨喙细胞呑噬塢红细胞过程各个阶段 巨噬细胞吞噬物的芟化亦具有与时间相关的雋点，巨噬细胞吞噬物在形态上易于 观察和检测，这些特征使得巨噬细胞在损伤时间推断过程中具有重要的法医学意义。 六、作业与思考題 画图显示巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程各个阶段。 咨：如表1. 在体外吞噬实验中，为什么随着吞噬时间延长，制片中出现的巨噬细胞數量城少？ 咎：巨噬细胞(Macwphmgcs)能够吞没、破坏受损伤组织，有助于启动康复过程。虽 然它们在损伤位点发禅关健作用，但一旦任务完成，就需要尽快撤离，结束炎症反应， 为再生过程开路。继续存在的巨噬细胞不利于组织恢复。 如不预先洗涤对红细胞会影响实脸结杲吗？为什么？ 咎：会。D-hanks液是一种平衡盐溶液，用于洗涤鸡血红细胞，如杲不洗涤则鸡血红细 胞含有钙偻离于，会破坏巨噬细胞溶酶体水解裁的活性，影响吞噬过程的进行。 七、反思与改进 注射时注意不要注入皮下或将针头插进小鼠内脏。进针部位选在下腹部，距离生殖 器约15处腹中线两侧，针头与皮肤保持约30度到45度角，针头进入皮肤约lcm； 可用一只手的拇指和食指将下腹部皮肤71腹,漠夹起，然后将针头摘入空腔。 要注意计时，不同阶段细胞的形态不同。 如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！ 4. 5. 6.