重组DNA技术与基因工程.pptxVIP

重组DNA技术与基因工程1 重组DNA技术与基因工程的基本概念重组DNA技术所需的基本条件2 重组DNA技术的操作过程3 目的基因的克隆与基因文库的构建4 外源基因在大肠杆菌中的表达5 外源基因在酵母中的表达6 3 重组DNA技术的操作过程切接转增检3 重组DNA技术的操作过程A DNA的体外重组（切与接）同种内切酶生产的粘性末端的连接同尾酶生产的粘性末端的连接不同粘性末端的连接人工粘性末端的连接基于同源重组的In-Fusion连接重组率GAATTCGAATTCCTTAAGCTTAAGAATTCG5 5GCTTAA AATTC AATTC5 5 GG555 AATTC5 GGGGCTTAA CTTAA CTTAA 55GAATTCGAATTCGAATTCGAATTCCTTAAGCTTAAGCTTAAGCTTAAG同种内切酶生产的粘性末端的连接5 5EcoRI退火AATTCGGCTTAAAATTCGGCTTAAT4-DNA ligase5 55 5GGATCCGGATCC5 5 CCTAGGCCTAGG55 5 5 TTTGATCATACTAG ACTAG ACTAGTACTAG 5TGATCCTGATCCGGATCAGGATCAACTAGGACTAGGCCTAGTCCTAGT同尾酶生产的粘性末端的连接BclIBamHI5 5 GATCAGATCCG5 GTCCTAG55退火