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实验五 离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
【实验目的】
学习一种离体组织器官实验方法 ; 观察离子成分、 酸碱度、 温度、 乙酰胆碱、 去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用; 分析平滑肌活动的某些生理特性及 理化环境改变对它的影响。
【实验原理】
消化道平滑肌具有自动节律性、 较大的伸展性, 对化学物质、 温度及牵张刺
激较为敏感等生理特性。
【实验材料】
实验动物:家兔, 2.0-2.5kg
实验药品:台式液、 0.01%去甲肾上腺素溶液、 品溶液、 1.0%氯化钙溶液、 1mol/l 盐酸溶液、
0.01%乙酰胆碱溶液、 0.01%阿托
1mol/l 氢氧化钠溶液。
实验器材: 恒温平滑肌槽、 小烧杯、 污物杯、 张力换能器、 双凹夹、 温度计、 BL-420 生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】
1. 恒温浴槽的准备工作;
2. 标本制备;
3. 仪器连接与设置;
4. 启动计算机,打开 BL-420 生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目
1. 自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性 收缩及张力水平。
2. 观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1) 乙酰胆碱的作用: 向浴槽标本管中加入 0.01%的乙酰胆碱溶液 1~2
滴,观察肠管张力和收缩有何变化。作用产生后,洗涤三次,进
行下一项实验。
(2) 阿托品的作用: 向浴槽标本管中加入 0.01%的阿托品溶液 2~3 滴, 两分钟后,再加入 0.01%的乙酰胆碱溶液 1~2 滴,观察肠管张力和收缩
有何变化。与( 1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一
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项实验。
3. 观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入 0.01%的去甲肾上腺素 2~3
滴,观察肠管张力和收缩有何变化。然后洗涤三次,待其活动稳定后,
进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响
向浴槽标本管中加入 1%的氯化钙溶液 2~3 滴,观察肠管平滑肌的反
应。然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响
向浴槽标本管中加入 1mol/l 的盐酸溶液 1~2 滴, 观察平滑肌的反应,
待作用出现明显后, 在此基础上, 加入 1mol/l 的 NaOH溶液 1~2 滴, 观察平滑肌
的反应。
【实验结果】
1. 乙酰胆碱对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动加强。
2. 阿托品和乙酰胆碱对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动不受影响。
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3. 去甲肾上腺素对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动减弱。
4. 钙离子对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动加强。
5. 酸碱度对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动先减弱后恢复。
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【注意事项】
1. 肠管勿牵拉过紧或过松,且连线必须垂直 , 且不得与浴槽的管壁等接触,以 免摩擦。
2. 浴槽中的液体的量应以高过肠断为准,并保持液面高度一致。
3. 药物应滴在肠管附近, 药物作用若不明显, 可以不加药物, 但不可一次过多。
4. 每次加药出现反应后,应必须立即更换浴槽内的台式液至少三次,待肠管恢 复稳定活动后,再观察下一个项目。
【实验思考】
1. 哺乳动物离体器官或组织在灌流液中保持良好状态应具备的条件?
温度:本实验控制恒定温度 37 度;湿度:要时刻记住用相应的润湿液润湿,
本次试验用哺乳动物的台氏液; PH:要与哺乳动物体液相似; 避免不必要的刺激:
不要用手或者是金属触碰; 离子成分与浓度: 要与相关的动物体液相似, 本实验
是台氏液。
2. 每一项实验结果的分析及原因解释:
①滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强, 这是因为乙酰胆碱与小肠平滑肌
肌膜上的 M受体结合后, 可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢
钙通道, 使大量的钙离子内流, 进而使动作电位产生的频率增加, 所以小肠的平
滑肌收缩增强; ②先加阿托品再加乙酰胆碱后对小肠平滑肌的收缩不影响。 因为
阿托品是乙酰胆碱的抑制剂, 故先加阿托品再加乙酰胆碱, 乙酰胆碱对小肠平滑
肌的收缩不影响; ③加入去甲肾上腺素后, 可见离体肠管活动减弱,
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