抗体基因文库 将不同的重链和轻链基因随机组合,克隆到合适的表达载体(噬菌体)中,在原核细胞表达不同的抗体,形成一个抗体库。 从这个抗体库中, 用抗原可以筛选到相应的抗体基因。 优点: 一是从不适合进行人工免疫的物种获得单克隆抗体,如人源单克隆抗体;二是可快速方便获得亲和力高、特异性强的克隆抗体。 主要的抗原抗体反应 抗体效价的测定 血清:血液凝固析出的淡黄色透明液体 ,在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原。 抗体效价(滴度,titer):通过血清学方法能显示一定反应的抗血清(或抗体)的最高稀释倍数(或稀释度的倒数)。如终点稀释度为1/100,则血清的效价(每1ml的血清中抗体效价)为100抗体单位的高低是衡量血清中抗体水平的一项检测指标。 试管凝集实验(tube agglutination test) 原理:大分子颗粒性抗原(细菌、红细胞)与其相应的抗体相结合,在适量的电解质存在及一定的温度下,经过一定的时间可出现肉眼可见的凝聚团块。一般以标准抗原测得免疫血清或患者血清中抗体的效价。 不加免疫血清 ++++、+++、++、+:凝聚强度 +:出现凝聚 -:无凝聚 抗体稀释度应根据: ①抗体效价高,溶液中特异性抗体浓度越高,工作稀释度越高;②一般讲,应用的抗体稀释度越大,温育时间越
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