植物组织渗透势的测定(质壁分离法).docx

实验 1 植物组织渗透势的测定（质壁分离法） 一、实验目的 观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植 物组织渗透势的方法。 二、实验原理 当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态， 植物细胞 内的压力势为零时， 细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。 该溶液的浓度称 为等渗浓度。 当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时， 细胞的等渗浓度将介于 刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的深液浓度。 代 入公式即可计算出春渗透势。 三、实验仪器、试剂、材料等 显微镜；载玻片及盖玻片；镊子；刀片 配成 0.5 —0.1mol/L 梯度浓度的蔗糖溶液各 50ml。 称 34.23g 蔗糖用蒸馏水配成 100ml，其浓度为 1m0le/L （母液） 。再配制成 下列各种浓度： 0.50mol/L ：吸母液 0.45mol/L ：吸母液 0.40mol/L ：吸母液 0.35mol/L ：吸母液 0.30mol/L ：吸母液 0.25mol/L ：吸母液 0.20mol/L ：吸母液 0.15mol/L ：吸母液 0.10mol/L ：吸母液 25ml+水 25ml 22.5ml+ 水 20.0ml+ 水 17.5ml+ 水 15.0ml+ 水 12.5ml+ 水 10.0ml+ 水 27.5ml 30.0ml 32.5ml 35.0ml 37.5ml 40.0ml 7.5ml+ 水 42.5ml 5.0ml+ 水 45.0ml 四、实验方法 将带有色素的植物组织（叶片） ，一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫 鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物，也可用蚕豆、玉米、小麦等 作物叶的表皮。 撕取下表皮， 迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中， 使其完全浸 入， 5— 10 分钟后，从 0.5mol/L 开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载 玻片上， 盖上盖玻片， 于低倍显微镜下观察， 如果所有细胞都产生质壁分离的现 象， 则取低浓度溶液中的制片作同样观察， 并记录质壁分离的相对程度。 实验中 必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度， 和不 引起质壁分离的最高浓度。 在找到上述浓度极限时， 用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次， 直至有把 握确定为止。 在此条件下， 细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势 相等。 将结果记录下表。 测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液最低浓度和不能引起质壁分离的最高 浓度平均值之后，可按下列公式计算在常压下该组织细胞质液的渗透势。 s RTiC s 为细胞渗透势。 R为气体常数 =0.083 ×105/L ·Pа/mol ·K。 T 为绝对温度，单位 K，即 273℃+t， t 为实验湿度。 I 为解离系数，蔗糖为 1。 C为等渗溶液的浓度，单位为 mol/L。 则： s =0.083 ×105 ×(273 ℃+t ) ×1×C 实验人 时间 蔗糖摩尔浓度（ mol/L ） 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25 0.20 0.15 0.10 五、实验作业： 材料名称 渗透势（ P а） 实验时室温 ℃ 质壁分离的相对程度（以图表示） 1、 叙述细胞渗透作用的原理。 2、 测定并计算不同植物组织的渗透势。 实验 2 植物组织水势的测定（小液流法） 一、实验目的 了解植物组织中水分状况的另一种表示方法及用于测定的方法和它们 的优缺点。 二、实验原理 将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中， 当找到某一浓 度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时， 则可认为此植物组织的水势等于 该溶液的水势。 因溶液的浓度是已知的， 可以根据公式算出其渗透压， 取其负值， 为溶液的渗透势（ψπ） ，即代表植物的水势（ψ w）（waterpotential ）。 ψw＝ψπ＝－ P＝－ CRT（大气压） 三、实验仪器、试剂、材料等 （一）材料：小白菜或其它作物叶片 （二）仪器设备： 1. 带塞青霉素小瓶 12 个； 2. 带有橡皮管的 注射针头； 3. 镊子； 4. 打孔器 5. 培养皿。 （三）试剂： 1.0.05 、