遗传的物质基础.pptVIP

或两条嘌呤和一条嘧啶链构成 (YR*R) CG*G，TA*A，CG*A。 G G G A C A A T C 第三十页，共53页。 六、DNA的变性和复性 变性：热，试剂，氢键、碱基堆积力破坏，DNA由双链变成单链 温度：80～100℃ 变性剂：尿素，甲酰胺 增色效应（hyperchromicity） 正常双链（50μg/ml） A260=1.00 完全变性的单链DNA A260=1.37 单核苷酸 A260=1.60 DNA双螺旋结构失去一半时，A260=1.185 第三十一页，共53页。 Tm值的影响因素： DNA的均一性 均一性高，Tm值的范围小 G-C含量 G-C含量高，Tm值高 经验公式 G-C%=(Tm-69.3)×2.44 介质中的离子强度 低离子强度易熔解变性 DNA保存在高浓度缓冲液中防变性（TE） 第三十二页，共53页。 复性 单链重新缔合为双螺旋的过程，一般比Tm低20～25℃下进行复性 过程：复性时溶液中单链DNA随机碰撞。GC先配对形成短的双链，然后配对区域延伸，象拉链一样 复性产生的不一定是原有的互补链