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06核糖体与核酶分析 06核糖体与核酶分析 PAGE / NUMPAGES 06核糖体与核酶分析 第六章.核糖体与核酶 核 糖 体 ( r i b o some ) ， 是 细 胞 内 一 种 核 糖 核 蛋 白 颗 粒 ( r i b on u cl eo p r ot ei n pa r t i cl e ) , 其 惟 一 功 能 是 按 照 mR N A 的 指 令 将 氨 基 酸 合 成 蛋 白 质 多 肽 链 , 所 以 核 糖 体 是 细 胞 内蛋白质合成的分子机器。 核 糖 体 最 早 是 Al b er t C l au d e 于 2 0 世 纪 3 0 年 代 后 期 发 现 的 , 其 后 又 证 明 了 其 蛋白质合成功能。 跟着分子生物学的发展， 核糖体观点的涵意有了进一步的发展。细胞内除了 从事蛋白质合成的核糖体外， 还有很多其余功能的核糖核蛋白体颗粒， 往常是 一些小分子的 RNA 同蛋白质构成的颗粒， 它们参加 RNA 的加工、RNA 的编写、 基因表达的调控等。 发现核糖体及核糖体功能判定的两个要点技术是什么 ?( 发现核糖体及核糖体功能判定的两个要点技术是 什么 ?（答案） 答 : 核 糖 体 最 早 是 Al b er t C l au d e 于 1 9 3 0 s 后 期 用 暗 视 野 显 微 镜 观 察 细 胞 的 匀浆 物 时 发 现 的 ， 当 时 称 为 微 体 ( M i c r o so me s) ， 直 到 1 9 5 0 s 中 期 ， Ge o r g e Pa l a d e 在 电 子 显 微 镜 下 观 察 到 这 种 颗 粒 的 存 在 。当 时 G eo r g e P a l ad e 和 他 的 同 事 研 究 了 多 种 生物的细胞，发现细胞质中有近似的颗粒存在，特别在进行蛋白质合成的细胞中 特 别 多 。 后 来 Ph i l i p Si ek ev i t z 用 亚 细 胞 组 份 分 离 技 术 分 离 了 这 种 颗 粒 ， 并 发 现 这 些颗粒老是陪伴内质网微粒体一同堆积。化学剖析揭露，这类微粒富含核苷酸， 随 之 命 名 为 r i b o so me ， 主 要 成 分 是 核 糖 体 RN A( r R N A) ， 约 占 6 0% 、 蛋 白 质 ( r 蛋 白质)约占 40%。 核糖体的蛋白质合成功能是经过放射性标记实验发现的。将细胞与放射性标记 的氨基酸短暂接触后进行匀浆，而后分级分别，发此刻微粒体部分有大批新合成 的放射性标记的蛋白质。后将微粒体部分进一步分别，获取核糖体和膜微粒，这一实验结果表示核糖体与蛋白质合成有关。 两个要点技术是亚细胞组份分别技术和放射性标记技术。 ) 6.1 核糖体的形态构造 核糖体是细胞内数目最多的细胞器，原核细胞和真核细胞都有核糖体，功能也 相同，可是构造构成却有很大差异。 1.1 核糖体的种类和化学构成 ■ 核糖体的种类 ● 按存在的部位:有三种种类核糖体，细胞质核糖体、线粒体核糖体、叶绿体核糖体。 ● 按存在的生物种类: 分为两种种类，即真核生物核糖体和原核生物核糖体。原 核 细 胞 的 核 糖 体 较 小 ， 沉 降 系 数 为 7 0S ，相 对 分 子 质 量 为 2. 5 x1 0 3 kD a， 由 5 0 S 和 30S两个亚基构成(图 6-1)；而真核细胞的核糖体体积较大， 沉降系数是 80S，相 对 分 子 质 量 为 3. 9 ～ 4. 5 x1 0 3 k D a， 由 6 0 S 和 40 S 两 个 亚 基 组 成 。 图 6 - 1 从 两 个 不 同 角 度 观 察 的 E. co l i 核 糖 体 的 三 维 结 构 M g 2 + 明:70S核糖 1 0m mo l /L ，  的浓度对于大小亚基的聚合和解离有很大的影响， 体外实验表 体 在 M g 2 + 的 浓 度 小 于 1 m mo l / L 的 溶 液 中 易 解 离 ; 当 M g 2 + 浓 度 大 于 两个核糖体往常形成 100S的二聚体(图 6-2)。 图 6-2 经过区带离心判定核糖体的亚基在 低 浓 度 的 M g2 + 时 ， 完 整 的 核 糖 体 将 分 成 大 小 两 个 亚 基 。 ● 在构成上，叶绿体中的核糖体与原核生物核糖体相同，但线粒体中核糖体 的大小变化较大(表 6-1)。 表 6-1 不一样种类核糖体的大小比较 根源 完好核糖体 核糖体亚基 核糖体 RNAs 细胞质 80S 60S(大亚基 ) 28S，5.8S，5S (真核生物 ) 40S(小亚基 ) 18S， 细胞质 70S 50S(大亚基 ) 23S，5S (原核生物 ) 30S(小亚