食品安全国家标准 果蝇伴性隐性致死试验.docxVIP

中华人民共和国国家标准 GB 15193.11—20XX 食品平安国家标准 果蝇伴性隐性致死试验 20XX-10-07 实施20XX 20XX-10-07 实施 宙家玺崖是否蓼员罢 发布 中国标准出版社授权北京万方数据股份在中国境内（不含港澳台地区）推广使用 本标府代皆）：果蝇伴性隐性致死试验 本标准与GB 15193.11 一2003相比，主要变化如下： 标准名称修改为.?食品平安囚家标准 果蝇伴性隐性致死试脸。 修订了“范圈,中受试物的具体内容：本标准适用于评价受试物的遗传避性作用; —增加了”术语和定义”丁试捡报告”和“结果解常二 ——修订了?.原理”中的局部内容。 中国标准出版社授权北京万方数据股份在中国境内（不含港澳台地区）推广使用 食品平安国家标准果蝇伴性隐性致死试验 1范围 本标淮现定r果蝇伴性隐性致死试验的根本技术要求. 本标准适用于评价受试物的遗传毒性作用. 2术语和定义 致死突变 基因纽中发生的?种改变.当它表达时.引起携带者死亡. 隐性突变 只在纯合子或半合子条件下被表讪的基因组中的一种改变。 伴性基因 存在于性染色体（X或Y＞X染色体上的基因. 3试验目的和原理 X染色体传给RR代怵蝇 传给代携蝇，位于X染色体上的隐性基因在F.F?代雄 蝇表现出来.据此，利用眼色性状由X染色体上的基因决定，用与X染色体的遗传相关联的特征来作 为观察在X染色体上形囚突变的标记.故以野生型维挽（红色圆眼.正常蝇）染毒,与Basc（Mu）kr-5）^ 蝇（淡杏色棒眼，在两个X染色体上各带?个倒位以防止R代把处即过的父系X染色体和份系XX染色体I：E述两点遗传规 Wlf F代的嫉蝇中表现出来,并箭眼色性状为标讪来判断试姓的结果。即根据孟德尔分类反响产生四 种不同表型的F：F：代中没有红色圆眼的堆蝇. 4仪器和试剂 仪器 电热恒温干垛箱、生化培养箱、立体解剖孙微镜、放大镜、空醐机、麻醉很、果蜿培养管、试管盘及架、 白硬板、海绵蛰,毛宅、海绵塞， 果蝇饲养用具洗净后于120 P枯燥消俄2 h后备用。 试剂 乙?.75%乙醇、丙史、吐温. 培养基的制备 蒙糖26小醇母粉4 g,加水150 m3. 玉米粉34 ■、酵母粉4 ■，加水150 m3。 步骤：先将的成分依次倒入混匀、看沸，最 后加丙酸2mL.搅匀,分装于果现培养管内.备用， 5试验方法 受试物 受试物应溶解或悬浮丁?适宜的溶媒中.溶媒应为无毒物,不与受试物发生化学反响。首选溶媒为 水，不溶于水的受试物可使用植物油（如橄榄油、玉米油等〉?不溶于水或油的受试物可使用妆甲基纤维 索、淀粉等配成混忌液或糊状物等.然后在给样前用原械水稀程。受试物应新鲜配制?有资料说明其溶 液或混悬液赭存稳定者除外, 实睑动物 黑应果她，雄蝇用3 口艇?4目解的野生型黑腹果i%（ Drosophila Melanoga^er , 用Base Muller-5系3日岭?52d?3d有无卵或早龄幼虫解出.以检查是否有非处女 现混入。 剂量 按常规方法求出果蝇LC汕成L1/2 LC由或LIK为高剂fit, 1/4 LD“为中剂城. 1/8 Lg为低剂量.另设阴性（或溶媒）及阳性［2 mmol/L甲基甲烷磺酸酩（MMS门对照虬 如果受试 物毒性较小,受试物参加纳养基的最大剂量可占培养基的5%.阳性对照物可用甲基磺酸乙酯、甲果磺 酸甲酯、N-亚确基二甲胺， 试验步骚和观察指标 接触受试物 受试物接触方法为经「I55 P2 min,放 入经饥饿4 h的雄蝇进行喂饲?接触受试物时何3 L 交配程序及方法 为检测受试物对哪一期生殖细胞最做感?将雄蝇在接触受试物后按2 3 3 d间隔（分那么表示对精 子■精细胞和精母细胞的效应）与处女蝇女配。即何一试管以1只经处理过的雄现按上述程序顺次与 2R代按嫌与雄H ； 1或1 ： 2）进行E. F：交轧12 d?14 d后观察F：代. 孵育混度为25 1。用乙酰对果蝇械行麻醉后可进行分组及E,代的性别分UL 每一个试轮组至少应有3 000个样本数. 6数据处理和结果评价 数据处理 根据受试染色体数（即F 式⑴计算。 致死率=致死管数/受试染色体数XI 000%） （ 1） 运用适合于试验设计的统计学检脸方法对对照组和试验组的致死率进行统计分析“结果评价时应 对试脸结果的生物学意义和统计学意义同时予以考虑。 结果评价 受试物诱发的致死率明显增加，与阴性对照组相比有统il?学差异，并且有剂众反响关系时判为阳 性：如无剂筮一反响关系时.应至少有一时间点的的性致死可重复并有统计学意义上的增加.也可判为 阳性。 7试验报告 试於名称，试典中位名称和联系方式、报告编号. 试捡委托单位名称和职系方式、样品受理日期： 试验开始和结束H期、试验工程负贵人、试验单位技术负责人、签发HWL 试