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胰酶消化贴壁细胞 胰酶消化贴壁细胞胰酶消化贴壁细胞贴壁细胞: 在体外培养条件下，必须贴附于支 持物表面才能生长的细胞。如CHO细胞。 消化：使经过分散的组织或贴壁的培养物相互或与介质解离，形成单细胞或小的细胞团的操作。 第一页，共35页。 贴壁细胞: 在体外培养条件下，必须贴附于支 持物表面才能生长的细胞。如CHO细胞。 消化：使经过分散的组织或贴壁的培养物相互或与介质解离，形成单细胞或小的细胞团的操作。 第二页，共35页。 贴壁细胞的消化 贴壁细胞在培养瓶中长成致密单层后，继续生长的空间不足，培养基中的营养成份也消耗较多，同时代谢废物也有较多堆积，需要分瓶培养，扩增、传代 。 贴壁较紧的细胞如Hela，HepG2，CHO等，则需要以细胞消化液消化后，才能脱落和分散，扩瓶 。常用的消化液为胰蛋白酶，EDTA等 第三页，共35页。 主要消化方式 一、酶消化法 ( 胰酶Trypsin ) 二、离子螯合剂 ( EDTA ) 第四页，共35页。 一、酶消化法 ( 胰酶Trypsin ) 1 ) 胰酶消化原理: 胰酶是一种蛋白酶。通过在特定位置上降解蛋白，使细胞膜上和培养皿壁结合处蛋白降解，使两者分离。这时细胞由于自身内部细胞骨架的张力以及培养液表面张力作用下成为球形。 细胞消化用