微生物限度检查方法计划适用性验证方案.docx

微生物限度检查方法计划适用性验证方案 微生物限度检查方法计划适用性验证方案 PAGE / NUMPAGESPAGE 微生物限度检查方法计划适用性验证方案 微生物限度检查方法合用性试验方案 . 考证方案组织与实行 微生物限度检查方法合用性试验工作应由质量管理部门负责组织，质量管理部门相关人员构成考证小组，参加实行。 方案草拟 部门/职务 签 名 日 期 质量管理部 QC 方案审查 部门/职务 签 名 日 期 质量管理部 QC经理 方案同意 部门/职务 批 准 人 批 准 日 期 质量管理部质量总监 ;.. . 目 录 一、概括 二、考证目的微风险评估 三、考证内容 四、方法判断 五、再考证周期 六、参照文件 七、结果评论及结论 ;.. . 1、概括： 微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包含需 氧菌数、霉菌数和酵母菌数及控制菌检查。当成立产品的微生物限度检查法时，应进行需氧菌、霉菌和酵 母菌计数方法的合用性试验和控制菌检查方法的合用性试验，以确认所采纳的方法合适于该产品的需氧 菌、霉菌和酵母菌数的测定和控制菌检查。 依据中国药典 2015版，需氧菌、霉菌和酵母菌及控制菌均采纳平皿法进行方法合用性试验。 2、试验目的微风险评估： 考证目的：确认所采纳的需氧菌、霉菌和酵母菌计数方法及控制菌检查方法合适我企业所生产产品的微生物限度检查。 风险评估： 项目 潜伏无效模式 无效影响 采纳举措 试验部分项目出现误差 直接影响试验结果的 严格履行经同意 未按方案履行 的试验方案 和漂移 正确性 试验过程操作不妥 未达到试验标准 试验失败 未严格按照试验方 案规定 3、考证内容： 、培育基根源： 品名 批号 规格 根源 确认人： 确认日期： 、检查用培育基配制方法： ;.. . 培育基名称 配制方法 氯化钠-蛋白胨缓冲液 取本品，加水1000ml，加热溶解，分装，121℃， 15分钟灭菌，备用。 胰酪大豆胨琼脂培育基 取本品40g，加水1000ml，加热溶解，分装，121℃，15分钟灭菌，备用。 胰酪大豆胨液体培育基 取本品，加水1000ml，加热溶解，分装，121℃， 15分钟灭菌，备用。 沙氏葡萄糖液体培育基 取本品，加水1000ml，加热溶解，分装，121℃， 15分钟灭菌，备用。 沙氏葡萄糖琼脂培育基 取本品，加水1000ml，加热溶解，分装，121℃， 15分钟灭菌，备用。 麦康凯琼脂培育基 取本品，加水1000ml，加热溶解，分装，121℃， 15分钟灭菌，备用。 麦康凯液体培育基 取本品，加水1000ml，加热溶解，分装，121℃， 15分钟灭菌，备用。 确认人： 确认日期： 、使用仪器 名称 型号 校验单位 有效期至 数显电热恒温培育 数显霉菌培育箱 确认人: 确认日期： 、考证试验用菌种： 菌种名称 代号 传代代数 根源 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌 铜绿假单胞菌 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌 黑曲霉菌 确认人： 确认日期： 试验方法： ;.. . 取供试品10ml加氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml→1:10供试液。需氧菌、霉菌和酵母菌、控制菌采纳惯例法。 菌液的制备： 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的胰酪大豆胨琼脂斜面培物一铂金 饵，加入胰酪大豆胨液体培育基中置 30～35℃培育箱中培育 18～24h，取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞 菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的胰酪大豆胨液体培育物 1ml加入％无菌氯化钠溶液中， 制成10-1 的菌液，依法10倍稀释至10 ～ 7 注入平皿中，立刻倾注胰酪大豆胨琼脂培育基 20ml， ，分取各菌悬液1ml 各菌悬液平行制备两个平皿，平皿法培育计数，取小于 100CFU/ml和1000CFU/ml的菌液备用。 取白色念珠菌的沙氏葡萄糖琼脂斜面培育物，加入沙氏葡萄糖液体培育基中置 20～25℃培育箱中培 养24～48h，取白色念珠菌的沙氏葡萄糖液体培育物 1ml 加入％无菌氯化钠溶液中，制成 10-1的 菌液，依法10 倍稀释至10～7，取菌悬液1ml注入平皿中，立刻倾注沙氏葡萄糖琼脂培育基 25ml，各菌悬 液平行制备两个平皿，平皿法培育计数，取小于 100CFU/ml和1000CFU/ml 的菌液备用。 取黑曲霉的新鲜培育物接种子沙氏葡萄糖琼脂斜面上， 20-25℃培育5-7天，加入3-5ml含0.05%聚 山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。取1ml加入含0.05%聚山梨酯80的9ml0.9% 无菌氯化 钠溶液中，制成 10-1的菌液，依法10倍稀释至10 ～7，取，取菌悬液 1ml 注入平皿中，立刻倾注沙氏葡 萄糖琼脂培育基 25ml，各菌悬液平行制备两个平皿， 平皿法培育计数， 取小于100CFU/ml 和