aro-细胞培养与病毒培养实验步骤.docxVIP

推荐精选 推荐精选 实验二传代细胞培养与病毒在传代细胞中的培养 一、 实验目的 了解倒置显微镜的构造与使用，了解不同传代细胞的形态及接毒后的病变特 征，掌握细胞的传代培养方法、病毒接种方法及收毒方法。 二、 常用细胞的种类 BHK-21 :仓鼠肾传代细胞 PK-15：猪肾传代细胞 IBRS-2：猪肾传代细胞 Hela：人的子宫瘤细胞 Vero：非洲绿猴肾细胞 Marc-145：来源于Vero细胞 TK-143：人的胸昔激酶阴性细胞 Sf9：昆虫细胞 三、 材料 1、 100ml细胞瓶、吸管、吸球、96孔细胞培养板、加样器、枪头 2、 BHK-21 (baby hamster kidney)细胞 3、 0. 25%胰酶 4、 生长液：含10%犊牛血清、200U/ml青、链霉素的DMEM 维持液：含2-5%犊牛血清、200U/ml青、链霉素的DMEM 5、伪狂犬病病毒液（PRV） 四、 传代细胞培养的条件要求 1） 细胞密度：2-3 X105个/ml 2） pH 范围 最适 pH7. 0-7.4,耐受 pH6. 6-7. 8 3） 培养温度 哺乳动物细胞一般为37°C 昆虫细胞28-30°C 五、 常用细胞分散剂与作用原理 1、 胰酶使精氨酸或赖氨酸的竣基和其他氨基酸的氨基之间的多肽链发生水解, 导致细胞间质水解而使细胞或组织块消化为分散的单个细胞。 2、 乙二胺四乙酸二钠（EDTA）