一种冻干型新型冠状病毒荧光PCR检测试剂盒及制备方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112795694 A (43)申请公布日 2021.05.14 (21)申请号 202011482560.7 C12R 1/93 (2006.01) (22)申请日 2020.12.16 (71)申请人 南通海关综合技术中心（江苏国际 旅行卫生保健中心南通分中心、南 通海关口岸门诊部） 地址 226000 江苏省南通市崇川路102号 (72)发明人 陈峰　吴海磊　唐晓宇　张阳　 刘文干　 (74)专利代理机构 石家庄科途知识产权代理事 务所(普通合伙) 13141 代理人 檀文礼 (51)Int.Cl. C12Q 1/70 (2006.01) C12Q 1/686 (2018.01) C12N 15/11 (2006.01) 权利要求书2页 说明书13页 序列表2页 附图24页 (54)发明名称 一种冻干型新型冠状病毒荧光PCR检测试剂 盒及制备方法 (57)摘要 本发明涉及一种冻干型新型冠状病毒荧光 PCR检测试剂盒及制备方法，所述的试剂盒包括： SARS‑CoV‑2冻干检测试剂和质控试剂；所述的 SARS‑CoV‑2冻干检测试剂为装有SARS‑CoV‑2反 应液的SARS‑CoV‑2冻干反应管(PCR管)，SARS‑ CoV‑2冻干反应管中主要成分包含(1)SARS‑CoV‑ 2检测的引物(和)探针：ORF1ab基因引物(和)探 针、N基因引物(和)探针和人β‑actin基因引物 (和)探针；(2)酶混合物：TaqDNA聚合酶、反转录 酶和RNA酶抑制剂；(3)PCR反应Buffer：Tris‑ 2+ HCl、dNTP和Mg 等；以及(4)冻干保护剂。本发明 A 所述的新型冠状病毒核酸检测试剂盒具有灵敏 4 度高、特异性好、常温运输和使用方便等优点。 9 6 5 9 7 2 1 1 N C CN 112795694 A 权　利　要　求　书 1/2 页 1.一种冻干型新型冠状病毒荧光PCR检测试剂盒，其特征在于：包括SARS‑CoV‑2冻干检 测试剂和质控试剂；所述的SARS‑CoV‑2冻干检测试剂为SARS‑CoV‑2冻干反应管，所述的 SARS‑CoV‑2冻干反应管中包括以下组分： SARS‑CoV‑2检测的引物和探针：ORF1ab基因引物和探针、N基因引物和探针和人β‑ actin基因引物和探针； 酶混合物：TaqDNA聚合酶、反转录酶和RNA酶抑制剂；PCR反应Buffer：Tris‑HCl、dNTP和 2+ Mg ；冻干保护剂； 所述的冻干保护剂为甘露醇、海藻糖、葡聚糖、明胶和蔗糖中的一种或多种； 所述的质控试剂包括阳性质控品和阴性质控品；所述的阳性质控品为含有T7启动子引 物序列的ORF1ab‑ssDNA(SEQ  ID NO:10)冻干粉末和N‑ssDNA(SEQ  ID NO:11)冻干粉末；所 述的阴性质控品为灭菌后焦碳酸二乙酯处理水； 所述的ORF1ab‑ssDNA、N‑ssDNA的序列SEQ  ID NO:10、SEQ  ID NO:11： SEQ  ID NO:10 TAATACGACTCACTATAGGGAGAAGGAACTGATTACAAACATTGGCCCGCTTCAGCGTTCTTCGGAATGTCGG AAGTCACACCTTCGGGAACGT