LC-MS原理以及应用.pptVIP

基础知识; 离子源 1.电感耦合等离子体离子化（icp） 由于该条件下化合物分子结构已经被破坏，所以仅适用于元素分析。 2.电子轰击电离（ei） 能提供有机化合物最丰富的结构信息，有较好的重现性，其裂解规律的研究也最为完善。 缺点在于不适用于难挥发和热稳定性差的样品。 3.化学电离（ci） 适合于色谱和质谱联用,低气压化学电离源可以在较低的温度下分析难挥发的样品，并能 使用难挥发的反应试剂，但是只能用于傅里叶变换质谱仪。 4.大气压电离源（api） 液质联用仪最常用的离子化方式。 常见的大气压电离源有三种：大气压电喷雾（ESI），大气压化学电离（APCI）和大气 压光致电离（APPI）。 由于大气压电离源是独立于高真空状态的质量分析器之外的，故不同大气压电离源之间 的切换非常方便。 5.基质辅助激光解吸离子化（maldi） 主要用于可达100000da质量的大分子分析，仅限于作为飞行时间分析器和FT-MS的离子源使用。特别适合蛋白质，多肽等大分子，可以直接从组织样品采集数据。 ; 电喷雾VS大气压化学电离 电离机理：电喷雾采用离子蒸发，而APCI电离是高压放电发生了质子转移而生成[M＋H]+或[M-H]-离子。 样品流速：APCI源可从0.2到2 ml／min；而电喷雾源允许流量相对较小,一般为0.2-1 ml／min. 断裂程度：APCI源的探头处于高温，热不稳定的化合物会分解. 适用范围：电喷雾有利于分析极性大的小分子和生物大分子及其它分子量大的化合物，而APCI更适合于分析极性较小的化合物。 多电荷：APCI源不能生成一系列多电荷离子;; 质量分析器 1.四极杆质量分析器 2.飞行时间质量分析器 3.离子阱质量分析器 4.傅里叶变换质量分析器四极杆质量分析器 5.扇形磁分析器 ;多级质量分析 ;为什么使用 HPLC/MS/MS?; MS/MS 串联四极杆质谱 比单四极杆质谱的抗基质干扰能力和定性能力更好，与离子阱质谱相比定量重现性和检测灵敏度更好 质量范围及分辨率??限 四极离子阱技术上而言，在传统QqQ的四极杆中加入了辅助射频，可以做选择性激发；或者就功能而言，为QqQ提供了多级串级的功能 四极杆-飞行时间质谱QMS作为质量过滤器，以TOFMS作为质量分析器。离子阱-飞行时间质谱以3D离子阱作为质量选择器和反应器，结合了离子阱的多级质谱能力和飞行时间质谱的高分辨能力线性离子阱-飞行时间质谱以线性离子阱为质量选择器和反应器，结合了线性离子阱的高灵敏度多级串级能力和飞行时间质谱的高分辨能力串联四极杆线性离子肼质谱仪 LTQ-FT液质联用串联质谱仪 Thermo Finnigan生产LTQ-FT液质联用串联质谱仪，实现了最先进的离子阱技术与傅里叶变换离子回旋加速器共振技术的完美结合，大大提高了分析的多样性。利用该联用技术得到的分析数据具有超高分辨率、精确质量数和多级质谱分析等特点。 ;质量分析器的性能特点;QqQ;具体应用;正离子模式：适合于碱性样品，可用乙酸或甲酸对样品加以酸化。样品中含有仲氨或叔氨时可优先考虑使用正离子模式。 负离子模式：适合于酸性样品，可用氨水或三乙胺对样品进行碱化。样品中含有较多的强伏电性基团，如含氯、含溴和多个羟基时可尝试使用负离子模式。 ?;离子峰的主要类型;一 分子离子峰;C8H18O化合物;氮规则;例如：CH4 M=16 12C+1H×4=16 M 13C+1H×4=17 M+1 12C+2H+1H×3=17 M+1 13C+2H+1H×3=18 M+2 ;同位素的相对丰度（强度）;;三、碎片离子峰;第一步：电荷或自由基的定位;第二步：化学键的断裂;1、σ―断裂;2、α―断裂;;最大烷基丢失规律;常见低质荷比碎片离子;3、重排断裂;011杂质-LCMS谱图;;杂质的可能结构式;; THANK YOU!;谢谢聆听！