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文章如果有不当或者不妥的地方,请您联系我修改文章或者删除文章,文章来源于网络收集,如果有侵权的问题,请联系我沟通协调改正,非常感谢您! 试验血糖定量测定 有色溶液对光线有选择性 吸收作用, 不一样物质因为其分子结构不一样, 对不一样波长光线 吸收能力也不一样, 所以, 每种物质都含有其特异 吸收光谱。有些无色溶液虽对可见光无吸收作用, 但所含物质能够吸收特定波长 紫外线或红外线。分光光度法是利用物质特有 吸收光谱来判别物质或测定其含量 技术。使用 仪器则称为分光光度计 。 分光光度技术 分光光度计 组成和结构 组成: 多个型号 紫外/可见分光度计, 不管是何种型式, 基础上都由五部分组成: (1)光源; (2)单色器(包含产生平行光和把光引向检测器 光学系统); (3)样品室; (4)接收检测放大系统; (5)显示或统计器。 国产分光光度计多年来已经有很大 发展, 多个档次 分光光度计都已更新升级换代, 可见光系列有: 721、722、723等型号, 紫外/可见光系列有: 751、752、753、754、756等型号。 分光光度法在生化试验技术中 应用 因为分光光度法极为灵敏、正确、快速和简便, 在复杂组分 系统中, 不需要分离, 即能检测出其中所含有 极少许物质。所以, 分光光度法现在已成为生物化学及其她生物科学相关领域研究中广泛使用 方法之一。 在生化试验中关键用于氨基酸含量 测定、蛋白质含量 测定、核酸 测定、酶活力测定、生物大分子 判定和酶催化反应动力学 研究等。 754型操作规程 开启电源, 用可见光测定时打开钨灯即可, 如使用紫外测定则还需打开氘灯, 指标灯亮, 使仪器预热20min以上。 按“Mod”键选择测试方法, 使开关置于T。 打开样品室盖(光门自动关闭), 按0%T键进行机械调零, 使数字显示为“0.00”。 将参比样品和被测样品分别倒入比色皿中, 放置比色架中, 旋动波长调整旋钮, 把测试所需 波长调整至刻度线处。 盖上样品室盖, 将参比溶液比色皿置于光路, 调整透过率“100”按钮, 使数字显示为100%T。然后按“Mod”键选择开关置于“A”, 使显示数字为“0.000”, 反复转换“A”、“T”为0、100三次, 可进行吸光度值测量。 吸光度A 测量: 按“Mod”键选择开关置于“A”使得参比溶液数字显示为0.000, 然后移入被测溶液, 显示值即为试样 吸光度A值。 测量完成后, 关闭电源, 清洗比色皿。 仪器使用结束后, 按要求填写仪器使用登记。 注意事项: 1、每台仪器所配套 比色皿是经过透射配对 , 不能相互调换。 2、使用比色皿时要将透光面对准光路, 勿用手触摸比色皿透光面, 比色皿盛液约2/3左右, 溶液中不能有气泡、悬浮物等, 以免影响测试精度。 3、只能在“T”档时打开样品室盖。 4、开关盖子及推拉转换时, 轻拿轻放, 以免溶液溅出腐蚀仪器。 5、清洗比色皿 过程中, 光面只能用擦镜纸擦。 血糖定量测定(Folin-Wu法) Cu2+( CuSO4 ) 还原糖 Cu+(Cu2O) Cu2O +酸性钼酸试剂 蓝色钼化合物 试验原理 葡萄糖 醛基含有还原性。无蛋白血滤液中 葡萄糖与碱性铜试剂混合加热后, 被氧化成羧基, 而碱性铜试剂中 二价铜则被还原成砖红色 氧化亚铜(Cu2O)沉淀。氧化亚铜又可使磷钼酸还原成低价 蓝色钼化合物。血滤液中 糖含量和产生 氧化亚铜量成正比, 氧化亚铜 量与形成钼化合物 量成正比, 可用比色法于420-440nm下测定。 测定血糖含量时必需先除去其中 蛋白质, 制成无蛋白滤液, 再行检验。向抗凝血中加入钨酸钠、硫酸锌、氢氧化锌及三氯乙酸等均可制得无蛋白滤液, 现常见钨酸法。钨酸钠与硫酸作用, 生成钨酸, 可使血红蛋白等变性、凝固、沉淀, 离心或过滤除去沉淀, 即得无蛋白血滤液, 此种滤液还适适适用于测定非蛋白氮、肌酸和尿酸等 Na2WO4 + H2SO4 → H2WO4 + Na2SO4 文章如果有不当或者不妥的地方,请您联系我修改文章或者删除文章,文章来源于网络收集,如果有侵权的问题,请联系我沟通协调改正,非常感谢您!
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