溴甲酚绿法测定血清白蛋白.pptVIP

整理课件 实验五 溴甲酚绿法测定血清清蛋白 一、实验目的 掌握：溴甲酚绿法测定血清清蛋白的基本原理和操作。 熟悉：血清清蛋白测定的临床意义。 了解：溴甲酚绿法测定血清清蛋白的特点和注意事项。 整理课件 二、实验原理　 pH=pI +OH- pHpI +H+ +OH- +H+ pHpI 氨基酸的兼性离子 阴离子 阳离子 血清清蛋白的pI为：4-5.8 在pH4.2的缓冲液中，清蛋白带正电荷 整理课件 血清清蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷，在有非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色的复合物，在波长630nm处有吸收峰，其颜色深浅与清蛋白的浓度成正比。 与同样处理的清蛋白标准比较，可求得血清中清蛋白含量。 二、实验原理　 清蛋白+ BCG 蓝绿色复合物 + - pH4.2 Brij-35 整理课件 三、试剂与器材 1. 0.5mol/L 琥珀酸缓冲贮存液 2. 10mmol/L BCG贮存液 3. 叠氮钠贮存液 4. 聚氧化乙烯月桂醚（Brij-35）贮存液 5. BCG试剂 6. 40g/L 清蛋白标准液 7. 分光光度计 ddH2O 400mL 琥珀酸缓冲贮液100mL BCG贮液8.0mL 叠氮钠贮液2.5mL