兽药残留检测技术抗生素类.pptVIP

LC法测定猪肌肉中氯霉素 试样中加入乙酸乙酯,超声提取,加入无水硫酸钠脱水,加入适量正己烷,过硅胶柱净化,用少量正己烷淋洗,再用甲醇洗脱氯霉素,洗脱液浓缩至干后用流动相溶解,进样分析,色谱柱为Li-Chromspher C18柱(100mm× 3.0mm,5μm),流动相为乙酸钠缓冲液(0.01mol/L,pH4.3) -乙腈(75+25),检测波长280nm,样品添加浓度10~50μg/kg的平均回收率为79%。 第六十二页，共91页 采用柱切换技术,反相色谱法测定猪肾中氯霉素残留量 样品用乙醚提取,提取液用氮气吹干,加入2mL乙腈和3mL石油醚溶解残余物,乙腈相吹干后,残余物用流动相溶解,进样。 第一柱为Li-Chromspher C18柱(100mm× 3.0mm, 5μm), 第二柱为PRP-l柱(100mm× 3.0mm,5μm),检测波长280nm,流动相为乙腈-水(90+10),方法检测限小于0.01μg/g,添加浓度在125μg/kg时的回收率为狃41.7%。 第六十三页，共91页 LC法测定黄鳝肉中氟苯尼考胺(FFA)的残留量 样品先酸解(样品酸解可以将氟苯尼考及其代谢物转化为FFA,并从组织中释出),然后用乙酸乙酯提取,碱化后过固相萃取柱,C18柱分离,紫外检测,样品添加浓度在0.075~35μg/g的回收率为85.7%~92.3%,相对标准偏差4.8%~17.2%,检测限0.044μg/g。 第六十四页，共91页 LC-MS/MS法测定奶制品中氯霉素残留量 样品经液-液提取,固相萃取柱净化后进样,负离子电喷雾电离,MRM检测。由于氯霉素分子中有两个氯原子,因此NIRM选择4对离子对:m/z 321→257,321 → 152(35Cl2)和323→ 257,323 → 152(37C135Cl), 虽然m/z 321→ 152的检测响应比其他离子对高,但基质对它有干扰,故选择仍m/z 321→ 257作为定量离子对,添加水平在0.1μg/kg、0.2μg/kg、0.5μg/kg时,回收率和精密度符合欧盟残留检测的要求,测定限和测定能力分别为0.03μg/kg和0.05μg/kg。 第六十五页，共91页 四、大环内酯类和林可霉素类 大环内酯类(Macrolides)是一类具有14~16员大环的内酯结构的弱碱性抗生素, 天然制品由链霉菌培养液中获取,经半合成改造可制得许多新型品种(图10-1)。 自1952年发现代表品种红霉素以来已陆续有竹桃霉素、螺旋霉素、吉他霉素、麦迪霉素、交沙霉素及它们的衍生物问世。 并出现动物专用品种如泰乐菌素、替米考星等。 第六十六页，共91页 大环内酯类的抗菌谱和抗菌活性基本相似,主霉对需氧革兰阳性菌、革兰阴性球菌、厌氧球菌及军团菌属、支原体属、衣原体属有良好作用。仅作用于分裂活跃的细菌,属生长期抑菌剂。 大环内酯类内服可吸收,体内分布广泛,胆汁中浓度很高,不易透过血脑屏障。主要从胆汁排出,粪中浓度较高。 林可霉素类(Lincosa而des)是一类具有氨基酸侧链单苷结构的碱性抗生素,天然制品由链霉菌培养液中取得,经半合成改造可制得新型品种,代表品种有林可霉素、克林霉素和吡利霉素。 第六十七页，共91页 林可霉素类抗菌谱较大环内酯类窄。革兰阳性菌及某些支原体(猪肺茨支原体、猪鼻支原体、猪关节液支原体)、钩端螺旋体均对本品敏感。而革兰阴性菌对本品耐药。 林可霉素类的最大特点是对厌氧菌有良好抗菌活性。本类药物的作用机理同大坏内酯类,主要作用于细菌核糖体的59s亚基,通过抑制肽链的延长而影响蛋白质的合成。 第六十八页，共91页 泰乐菌素 动物组织中残留量取决于给药方式。肌注在注射部位和肾中残留量为最高,内服在肝中残留量为最高,而且肌注比内服残留量高、滞留时间更长。由于内服残留量比较低,因此饲料中即使添加1000mg/kg,家畜喂服后在肝脏中也很难检测到残留物。 泰乐菌素可以迁入奶和蛋中,产蛋母鸡和泌乳奶牛禁用。有试验表明,奶17.6mg/kg,连续5日,停药后3天内奶中可检出残留量,平均浓度为0.03mg/kg。牛日因肌此注, 奶牛用药后96h内采的奶不能供人类食用。 肉鸡宰杀前,饲服休药期1天,肌注休药期3天。火鸡和猪宰杀前休药期5天和21天。 第六十九页，共91页 替米考星 与其他大环内酯类抗生素相比,替米考星用药安全性低,其毒作用的靶器官是心脏,可引起心动过速和收缩力减弱。 内服或皮下注射本品后吸收快,组织穿透力强,分布容积大,尤以肝和乳中浓度较高。半衰期可达1~2日,体内维持时间长。 通过给牛放射性标记替米考星的测定,发现主要通过粪排泄;可食组织、肝和肾中含高浓度的残留,尤以肝中残留量为最高且滞留期长;28天后肝中母体残留量降至1mg/ kg; 在体内滞留时间长,产奶期奶牛和肉牛犊