兽用疫苗生产与检验技术.pptVIP

3）蜂胶佐剂 蜂胶是蜜蜂采集植物分泌的树脂，混入蜜蜂上颚腺分泌物，以及蜂蜡、花粉和其他一些有机与无机物的一种天然物质，具有广谱的生物活性。蜂胶作为疫苗佐剂需进行纯化，蜂胶佐剂具有良好的免疫增强作用，能增强巨噬细胞的吞噬能力，促进抗体的产生，提高机体的特异性和非特异性免疫力。 4.3、佐剂的类型 第六十二页，共107页 4）人工合成佐剂 研究最多的属胞壁酰二肽（MDP）及其衍生物、海藻糖合成衍生物，已合成了多种MDP的类似物和衍生物，这类佐剂和抗原形成油包水乳剂，接种动物具有有效的佐剂活性，但作为水溶液接种动物后，迅速排出，其佐剂活性受到限制。海藻糖合成衍生物有海藻糖-6，6′-双霉菌酸酯（TDM），又称索状因子，最初从分枝杆菌细胞中发现。TDM有多种生物学活性，抗感染和抗肿瘤。 4.3、佐剂的类型 第六十三页，共107页 5）微生物及其代谢产物佐剂 为细菌的菌体成分，具有明显的佐剂作用。如革兰氏阴性菌外膜脂多糖（LPS）、分枝菌的胞壁成分、革兰氏阳性菌的脂磷壁酸（LTA）、蛋白毒素等。 6）免疫刺激复合物佐剂（ISCOM） 是由两歧性抗原与Quil A和胆固醇1：1：1的分子混匀共价结合而成的一种较高免疫活性的脂质小泡。Quil A是从皂树皮提取的一种糖苷，纯化的Quil A能与病毒被膜蛋白或细菌和寄生虫的外膜蛋白的疏水基结合。ISCOM现已广泛用于多种细菌、病毒和寄生虫病的疫苗。 4.3、佐剂的类型 第六十四页，共107页 7）细胞因子类佐剂 多种细胞因子是有效的免疫增强剂，能增强由病毒、细菌和寄生虫疫苗产生的保护作用。这类细胞因子主要有白细胞介素-2、白细胞介素-1、?-干扰素及白细胞介素-12。 8）其它佐剂 这类佐剂主要有非离子阻断共聚物表面活性剂、核酸及其类似物佐剂和左旋咪唑等。 4.3、佐剂的类型 第六十五页，共107页 1）用铝胶作佐剂 配苗时，将灭活的菌液和氢氧化铝胶以一定的比例（3：1—9：1）混合，再加入适量的硫柳汞和苯酚充分振荡而成。用明矾作佐剂配苗时，按灭活的菌液量加入明矾溶液1－2％，充分振荡，然后沉淀而成。 2）用油佐剂配苗，以白油、司本和硬脂酸铝为油相，以含2—4%吐温的抗原液为水相，按水相与油相1：1—1：4（V/V）的比例配制。在胶体磨或乳剂缸内配制成油包水或水包油包水疫苗。 3）蜂胶作佐剂 配苗时，在灭活的抗原液（病毒液或菌液）中加入蜂胶乙醇浸液，使每ml抗原液中含蜂胶10mg，变加变振荡，成为乳浊状，即为蜂胶佐剂疫苗。 4.4 制苗工艺 第六十六页，共107页 弱毒活疫苗是用人工培育的弱菌（毒）株或自然弱（无）毒菌（毒）株或异种菌（毒）株或基因工程弱毒疫苗株生产的，对原宿主动物无致病性或引起亚临床感染，但能使接种动物产生免疫力，以抵抗由该种病原引起的疾病。弱毒疫苗又称活疫苗，大多数采用冷冻干燥技术生产成冻干疫苗，少数为液体（湿）疫苗。弱毒疫苗具有用量少、成本低、免疫力产生快、免疫期长等优点。 （二）活疫苗制备技术 第六十七页，共107页 1.1、 菌种的选育 1） 自然弱毒菌株 自然界中存在着具有免疫原性的自然弱毒株，可以用于生产活疫苗。如布鲁氏菌病猪2号株就是自然界中存在的弱毒株，已成功地用于制作活疫苗。 2） 人工传代致弱菌株 在培养基中或非宿主体内等连续传代减弱病原的致病性，以制作活疫苗。如致弱的兔、山羊、绵羊牛传染性胸膜肺炎菌株、布鲁氏菌羊型5号菌株、乳兔肺致弱的猪支原体肺炎疫苗株等。 1、菌（毒）种的选育 第六十八页，共107页 3） 改变培养环境致弱菌株 在体外培养传代病原菌时，某些突变株在正常环境中不易生长发育而死亡，但改变培养温度（提高或降低），或在培养基中加入有抑制病原的化学物质，有利于某些突变株的发育，如在培养基中加醋酸铊分离培育出了抗醋酸铊的猪副伤寒沙门氏菌和马流产沙门氏菌弱毒菌株。 4） 诱变菌株 射线处理病原微生物或在体外的培养基中加入化学诱变剂，都能提高微生物的突变率，从而有助于弱毒株的培育。如用黄色素培养基培育猪丹毒弱毒菌株。许多疫苗的温度敏感株（ts）都经过诱变选择的。 1.1、 菌种的选育 第六十九页，共107页 1） 自然弱毒株 选用自然界中具有免疫原性的天然弱毒株，可以用于生产动物用活疫苗。如NDVLa Sota株和B1株，鸡马立克氏病血清II型（SB1、Z4）毒株，已成功地用于制作活疫苗。 2） 同属异种的微生物 选择与病原同属不同种，但具有一定的交叉免疫原性，天然宿主不同的微生物株系作为疫苗株，如火鸡疱疹病毒预防鸡马立克氏病，山羊痘细胞致弱毒株预防绵羊痘和羊接触传染性脓疱皮炎等。 1.2、毒种的选育 第七十页，共107页 3） 人工传代致弱毒株 在培组织或细胞培养中、鸡