《兴奋剂检测》PPT课件.pptVIP

兴 奋 剂 检 测;一、兴奋剂概况;掉进“尿瓶子”的“体坛精英们”！;“兴奋剂”一词源于英文词dope，原义为“供赛马使用的一种鸦片麻醉混合剂”。 兴奋剂是国际上体育界对违禁药物的总称。 国际体育组织对兴奋剂的含义作了下述规定：“健康人以特殊的目的，把药物以任何形式摄入体内，或者以不正常的方法应用非正常量的生理物质，这些在比赛中用来提高运动成绩的做法，称之为应用兴奋剂”。;兴奋剂发展; 出现严重的性格变化 产生药物依赖性 导致细胞和器官功能异常 产生过敏反应，损害免疫力 引起各种感染（如肝炎和艾滋病） ;二、兴奋剂分类和方法 ;麻黄素;常见苯丙胺类兴奋剂及其药理作用;吗啡;（三）、合成类固醇;（四）、利尿剂;（五）、β-阻断剂;? ?大多以激素的形式存在于人体1、人体生长激素（hGH）2、胰岛素3、促红细胞生成素（EPO）4、促性腺素;又称为血液红细胞回输技术，增强血液载氧能力。1988年汉城奥运会正式被国际奥委会列入禁用范围。 ;四、兴奋剂检测过程 ; 1967年，用气相色谱法（GC）、薄层色谱法（TLC）进行分离鉴定，使用了4种GC填充柱系统，氢焰离子化检测器，可检出40种兴奋剂。 1972年，采用了程序升温方法，并用氮磷检测器检测。 1976年，使用气相色谱-质谱联用手段检测甾体。 1980年，用毛细管气相色谱法检测，至1984年大体基本定型，并增加了用高效液相色谱法检查几种特定药物及咖啡因定量等工作。 近年来，毛细管电泳、免疫测定、GC - MS - MS等技术广泛应用。;检测流程图; 尿检是兴奋剂检测的常规武器，主要针对传统兴奋剂和各种合成代谢类固醇。 其优点在于： 取样方便 对人无损害 尿液中的药物浓度高于血液中的药物浓度 尿液中的其他干扰少 ; 分析过程中按药物的化学特征和分析方法将所有药物分成四类， 第一类：尿中以游离形式排泄的易挥发性含氮化合物（主要是刺激剂）； 第二类：尿中以硫酸或葡萄糖醛酸结合的难挥发性含氮化合物（主要是麻醉止痛剂，β阻滞剂和少数刺激剂）； 第三类：化学结构和特性特殊的刺激剂（咖啡因，匹莫林）和利尿剂； 第四类：合成类固醇及睾酮。; 尿检不足 常规尿检不仅对血红细胞生长素EPO和促生长激素HGH等禁药无能为力，即使对合成代谢类固醇的“变种”——THG等物质也毫无办法。;血样检测的目的主要是补充尿样分析方法的不足，是针对EPO的一种检测方式。;2000年，悉尼奥运会第一次实施EPO检测计划，把血检列为兴奋剂检测项目，成为奥林匹克反兴奋剂史上的里程碑。该计划将“EPO2000”血检法和法国科学家开发出来的尿检EPO法共同实施，血液和尿样检测同时呈阳性的运动员才会被处罚，而拒绝血检的运动员将被定为与服禁药同罪。; “EPO2000”研究计划是澳大利亚科学家主导的一项国际合作研究。该项研究最终发现，人体内有三种物质可作为服用生长激素后的标靶物。这三种物质的体内含量有特定变化曲线，一旦异常就说明有体外摄取。按照这种检测技术，通过抽取大约10毫升的血样，便可发现运动员三周前是否注射过EPO。 法国科学家开发的是一种新型尿检法。通过分析合成EPO与自然EPO电荷上的微小差别，可检测出当事人在3天内是否接受过EPO兴奋剂注射。 悉尼奥运会期间，血检可以有效地查出EPO，但对于HGH仍然无能为力。 ;HGH的作用类似于一种合成代谢类固醇，能够帮助肌肉生长并帮助运动员从训练疲劳中迅速恢复。 由于HGH也能自然生成，关键问题就是如何区分人体自然产生的HGH和人工合成的HGH。 虽然HGH早在20世纪80年代就被列为违禁药物并被怀疑大量使用，但现有的检测手段却根本无法追寻到它的踪影;2003年10月底，国际奥委会和世界反兴奋剂机构称，已找到检测人工合成HGH的方法，并在雅典奥运会上实施。;“猫”能捉光所有的“老鼠”吗;基因兴奋剂将成为下一代兴奋剂的“主角”，基因兴奋剂的检测将成为国际体育界面临的一个新难题，与其他兴奋剂相比，基因兴奋剂更难被检测出来。因为人为植入的基因所产生的蛋白质，与人体天然形成的蛋白质看起来完全相同。 ;对载体和导入的外源性基因的检测 对基因表达后各类产物的检测 对常规生化指标的检测 困难重重↑ 德国科隆体育学院，2009年3月表示其已开发出新的利用质谱检测基因兴奋剂的方法，该方法将从2012年伦敦奥运会开始使用。通过该方法检测出的禁药包括GW1516。 ;五、兴奋剂检测实例 ;目的：建立RP-HPLC法测定安乃近中的4-N-去甲基安乃近。 方法：色谱柱为Agilient ODS柱（4.6 mm×150 mm×5μm），以甲醇0.02 mol·L-1：磷酸二氢钾溶液（38:62）（含1.35％的亚硫酸钠）（用